Please use this identifier to cite or link to this item: http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/60384
Full metadata record
DC FieldValueLanguage
dc.contributor.advisorThananya Thongtan-
dc.contributor.advisorPoonlarp Cheepsunthorn-
dc.contributor.authorKiat Ruxrungtham-
dc.contributor.otherChulalongkorn University. Faculty of Medicine-
dc.date.accessioned2018-10-04T08:43:38Z-
dc.date.available2018-10-04T08:43:38Z-
dc.date.issued2010-
dc.identifier.urihttp://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/60384-
dc.description.abstractJapanese encephalitis virus (JEV), a mosquito-borne flavivirus, is a major cause of viral encephalitis in Asia. Even though the principle target cells for JEV in the central nervous system are neurons, the microglia is activated in response to JEV infection. Viral attachment to a host cell is the first step of the viral entry process and is a critical mediator of tissue tropism. This research aimed to identify molecules associated with JEV entry to microglial cells and examine their function as viral receptor. One dimensional and Two-dimensional gel electrophoresis were applied to separate the membrane proteins. Virus overlay protein binding assay (VOPBA) and liquid chromatography-mass spectrometry (LC/MS/MS) identified the laminin receptor protein and nucleolin as a potential JEV binding proteins. These newly identified JEV binding proteins were further characterized for their function as viral receptors by infection inhibition assay using anti-laminin receptor and anti-nucleolin. Other possible candidate receptor molecules including Hsp70, Hsp90, GRP78, CD14 and CD4 were also applied in the antibody mediated inhibition of infection experiments. Results showed that both anti-laminin receptor and anti-CD4 antibodies significantly reduced virus entry (25-40%). Significant inhibition of virus entry (up to 80%) was observed in the presence of lipopolysaccharide (LPS) which resulted in a complete down regulation of CD4. These results suggest that multiple receptor proteins may mediate the entry of JEV to microglial cells, with LPS receptor molecules playing a major role.en_US
dc.description.abstractalternativeเชื้อไวรัสไข้สมองอักเสบเจอี (JEV) จัดอยู่ในกลุ่มแฟมิลี่ฟลาวิไวริเดอีซึ่งมียุงเป็นพาหะนำโรค ใน ทวีปเอเชียเชื้อไวรัสไข้สมองอักเสบเจอีเป็นสาเหตุหลักในการก่อโรคไข้สมองอักเสบที่เกิดจากการ ติดเชื้อไวรัส ถึงเเม้ว่าเซลล์เป้าหมายหลักของเชื้อไวรัสไข้สมองอักเสบเจอีในระบบประสาท ส่วนกลางคือเซลล์ประสาท แต่เซลล์ไมโครเกลียจะอยู่ในภาวะถูกกระตุ้นเมื่อมีการติดเชื้อไวรัสนี้ เช่นกัน การจับของไวรัสที่ผิวเซลล์เจ้าบ้านเป็นขั้นตอนสำคัญขั้นเเรกของการติดเชื้อ ดังนั้นงานวิจัย นี้จึงมีวัตถุประสงค์ที่จะบ่งชี้และทดสอบการทำหน้าที่เป็นโปรตีนต้อนรับไวรัสไข้สมองอักเสบเจอี บนผิวเซลล์ไมโครเกลีย คณะผู้วิจัยได้ทำการเเยกโปรตีนที่ผิวเซลล์ด้วยเทคนิค One-dimensional และ Two-dimensional gel electrophoresis ตามด้วยเทคนิค virus overlay protein binding assay (VOPBA) และวิเคราะห์ชนิดโปรตีนด้วย liquid chromatography-mass spectrometry (LC/MS/MS) เพื่อบ่งชี้โปรตีนบนผิวเซลล์เพาะเลี้ยงไมโครเกลียที่สามารถจับกับเชื้อไวรัสไข้สมอง อักเสบเจอี จากผลการทดลองพบว่าโปรตีน laminin receptor และโปรตีนนิวคลีโอลินสามารถจับ กับไวรัสไข้สมองอักเสบเจอีอย่างจำเพาะ เมื่อทดสอบการทำหน้าที่เป็นโปรตีนต้อนรับสำหรับเชื้อ ไวรัสไข้สมองอักเสบเจอีบนผิวเซลล์ไมโครเกลียด้วยเทคนิค infection inhibition assay ด้วยการใช้ เเอนติบอดี้ต่อโปรตีนที่บ่งชี้ทั้งสองชนิดดังกล่าวรวมทั้งเเอนติบอดี้ต่อ Hsp70 Hsp90 GRP78 CD14 และ CD4 จากผลการทดลองพบว่าเเอนติบอดี้ต่อโปรตีน laminin receptor และ CD4 สามารถลดการติดเชื้อของไวรัสได้อย่างมีนัยสำคัญ (25-40%) นอกจากนี้การติดเชื้อไวรัสของ เซลล์ไมโครเกลียในสภาวะที่มี lipopolysaccharide (LPS) ซึ่งนำไปสู่การยับยั้งการเเสดงออกของ โปรตีน CD4 สามารถลดการติดเชื้อของไวรัสได้ถึง 80% จากผลการทดลองชี้แนะว่าการเข้าสู่ เซลล์ไมโครเกลียของไวรัสไข้สมองอักเสบเจอีอาศัยโปรตีนต้อนรับหลายชนิดบนผิวเซลล์โดยมี โปรตีนต้อนรับของ LPS ทำหน้าที่เป็นโปรตีนต้อนรับหลักen_US
dc.language.isoenen_US
dc.publisherChulalongkorn Universityen_US
dc.rightsChulalongkorn Universityen_US
dc.subjectMicrogliaen_US
dc.subjectJapanese B encephalitis -- Preventionen_US
dc.subjectEncephalitis -- Preventionen_US
dc.subjectไมโครเกลียen_US
dc.subjectไข้สมองอักเสบ -- การป้องกันen_US
dc.subjectสมองอักเสบ -- การป้องกันen_US
dc.titleAn analysis and studies expression of receptor molecule on microglia cells to inhibits infection of the cells from Japanese encephalitis virus : Research report (Year 2010)en_US
dc.title.alternativeการวิเคราะห์และศึกษาการแสดงออกของโมเลกุลตัวรับบนผิวเซลล์ไมโครเกลียในเซลล์เพาะเลี้ยงและในสัตว์ทดลองเพื่อยับยั้งการติดเชื้อและการตายแบบทำลายตัวเองของเซลล์จากไวรัสไข้สมองอักเสบ Japanese encephalitis : รายงานการวิจัย ปี 2553en_US
dc.typeThesisen_US
dc.email.advisorPoonlarp.C@Chula.ac.th-
dc.email.advisorkiat.r@chula.ac.th-
Appears in Collections:Med - Research Reports

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
Thananya Th_Res_2553.pdf585.98 kBAdobe PDFView/Open


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.