Please use this identifier to cite or link to this item: http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/6292
Title: การตรวจหาลำดับเบสของจีนไดไฮโดรไฟเลท รีดักเตส-ไทมิไดเลท ซินเทสของเชื้อมาเลเรียสายพันธุ์บริสุทธิ์ ที่มีระดับความไวต่อยาไพริเมทามีนต่างกัน ด้วยวิธีการหาลำดับเบสโดยตรง : รายงานผลการวิจัย
Other Titles: Sequence analysis of the dihydrofolate reductase-thymidylate synthase gene in both pyrimethamine-sensitive and -resistance clones from induced mutation by direct sequencing
Authors: พงชัย หาญยุทธนากร
กาญจนา รังษีหิรัญรัตน์
Email: Hpongchai@Chula.ac.th
Kanchana.R@Chula.ac.th
Other author: จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. คณะวิทยาศาสตร์
จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. สถาบันวิจัยวิทยาศาสตร์การแพทย์
Subjects: จีนไดไฮโดรโฟเลท รีดักเตส-ไทมิไดเลท ซินเทส
มาลาเรีย
การดื้อยา
ไพริเมธามีน
Issue Date: 2541
Publisher: จุฬาลงกรณ์์มหาวิทยาลัย
Abstract: ในอดีตยาไพริเมทามีน เป็นยาที่ให้ผลดีในการรักษษไข้มาลาเรียที่เกิดจาก Plasmodium falciparum โดยใช้ร่วมกับยาซัลฟาด็อกซิน แต่ในปัจจุบันยาดังกล่าวได้ลดความสำคัญในการใช้ลงเนื่องจากการแพร่กระจายของเชื้อมาลาเรียที่ดื้อต่อยาในส่วนต่าง ๆ ของโลกอย่างกว้างขวาง ไพริเมทามีนเป็นยาในกลุ่ม antifolate ที่สามารถยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ dihydrofolate reductase-thymidylate synthase (DHFR-TS) ของเชื้อมาลาเรียซึ่งมีบทบาทสำคัญในการสังเคราะห์สารจำนวนนิวคลีโอไทด์ที่เป็นองค์ประกอบหลักของดีเอ็นเอ จากการศึกษาลำดับเบสของจีนที่มีรหัสในการสร้างเอนไซม์ DHFR-TS ของเชื้อมาลาเรียชนิด P. falciparum สายพันธุ์บริสุทธิ์ T9/94/RC17 และสายพันธุ์ผ่าเหล่าที่เป็นสายพันธุ์บริสุทธิ์อีก 2 สายพันธุ์ (T9/94/M1-1-(b3) และ T9/94/300.300) ที่ได้จากการกลายพันธุ์ของสายพันธุ์ T9/94 โดยใช้สารเคมี ทำให้มีคุณสมบัติในการดื้อต่อยามากกว่าสายพันธุ์ T9/94 และสายพันธุ์บริสุทธิ์T9/94/RC17 ถึง 100 เท่าและ 10 เท่า ตามลำดับ พบว่าในส่วนของจีน TS ไม่มีความแตกต่างของลำดับเบสในสายพันธุ์บริสุทธิ์ทั้งสาม แต่สายพันธุ์บริสุทธิ์ T9/94/300.300 มีเบสตำแหน่ง 613 แตกต่างไปจากเดิมซึ่งทำให้เอนไซม์ในส่วน DHFR มีกรดอะมิโนที่ตำแหน่ง 164 เปลี่ยนไปจาก ไอโซลูวซีน (isoleucine) เป็นเมไทไอนีน (methionine) ส่วนในสายพันธุ์บริสุทธิ์ T9/94/M1-1-(b3) ไม่มีการเปลี่ยนแปลงของลำดับเบสในจีนดังกล่าวแสดงว่า การดื้อยาของสายพันธุ์บริสุทธิ์นี้อาจเกิดจากการเปลี่ยนแปลงของการถอดและ/หรือ การแปลรหัสของจีนดังกล่าว ทำให้มีการสร้างเอนไซม์ชนิดนี้ได้มากกว่าสายพันธุ์ T9/94/RC17 ดังนั้นการที่สายพันธุ์บริสุทธิ์ทั้งสองมีระดับของการดื้อยาต่างกันอาจเนื่องมากจากกลไกในการดื้อยาต่างกันนั่นเอง
Other Abstract: Pryimethamine was a drug of choice for Plasmodium falciparum treatment together with sulfadoxin, but, now it is not recommended as an effective treatment because of the widely distributed resistance strains in different parts of the world.Pyrimethamine is an antifolate drug. It binds to dihydrofolate reductase-thymidylate synthase (DHFR-TS) enzyme which plays an important role in nucleotide synthesis and leads to function inhibition. In this study, T9/94/RC17 clone and other clones chemically induced mutants, T9/94/M1-1-(b3) and T9/94/300.300, which are more resistance to their parent and T9/94/RC17 about 100 and 10 times respectively, were analyzed and compared their DHFR-TS sequences. The comparison showed that there is no base change in the TS gene among these three clone. There is a base change at position 613 which results to amino acid change from isoleucine to methionine at position 164 in the DHFR protein of the T9/94/300.300 clone. However, there is no base change in the DHFR gene of the T9/94/M1-1-(b3) clone which suggested that changes in the transcription and/or translation of DHFR-TS gene may play an important role as the mechanism of pyrimethamine resistance in T9/94/M1-1-(b3). Different levels of resistance in these two clones may result from the different drug resistance mechanisms.
URI: http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/6292
Type: Technical Report
Appears in Collections:Sci - Research Reports

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
Pongchai(segu).pdf3.69 MBAdobe PDFView/Open


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.