Please use this identifier to cite or link to this item: http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/8297
Title: Immobilization of RGD Peptides on surface of Tyrosine-Derived Polycarbonate to enhance cell adhesion and proliferation
Other Titles: การตรึงอาร์จีดีเพปไทด์บนพื้นผิวของพอลิคาร์บอเนตที่มีไทโรซีนเพื่อเพิ่มการยึดเกาะและการเพิ่มจำนวนของเซลล์ : รายงานผลการวิจัย
Authors: Voravee P. Hoven
Kohn, Joachim
Adisorn Poopattanapong
Email: vipavee.p@chula.ac.th
KOHN@RUTGERS.EDU
No information provided
Other author: Chulalongkorn University. Faculty of Science
Rutgers University. Department of Chemistry
No information provided
Subjects: Tyrosine
Polycarbonates
Immobilized cells
Peptides
Amino acids
Issue Date: 2006
Publisher: Chulalongkorn University
Abstract: This research has focused on chemical immobilization of RGD-containing peptides (RGD, RGDS, GRGDS) on the surface of tyrosine-derived polycarbonates having carboxyl pendant groups, poly(DTE-co-20%DT carbonate) through a two-step reaction. The first step involved an activation of carboxyl groups by N-hydroxysuccinimide (NHS) in the presence of 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride (EDCI). The second step was a covalent attachment of RGD-containing peptides. The success of peptides. The success of peptide immobilization was determined by the ninhydrin method and x-ray photoelectron spectroscopy (XPS). Using hexamethylenediamine as a standard, the grafting density of ~8.07x10[superscript -8], 6.51x10[superscript -8], and 5.13x10[superscript -8] mol/cm[superscript 2] were estimated for the immobilization of RGD, RGDS, and GRGDS, respectively. According to XPS analysis of RGD-immobilized poly(DTE-co-20%DT carbonate) surface after labeling with heptafluorobutyryl chloride, 30 and 74% substation were calculated for the immobilization of RGDS and GRGDS, respectively. Results from in vitro cell studies demonstrated that among all studied RGD-containing peptides, GRGDS can best enhance fibroblast (B95) adhesion and proliferation on the polymer surface. Taking 100% of TCPS as a positive control, cell adhesion ratio proliferation ratio were elevated from 92 and 100% of the virgin polymer to 117 and 129% respectively, after GRGDS immobilization. Evidently, the extra glycine spacer introduces the flexibility to the peptide and thus allows the RGD part to effectively mediate its specific response to the cells.
Other Abstract: งานวิจัยนี้เป็นการศึกษาการตรึงทางเคมีของเพปไทด์ที่มีลำดับกรดแอมิโนอาร์จีดี (อาร์จีดี อาร์จีดีเอส และจีอาร์จีดีเอส) บนพื้นผิวของพอลิคาร์บอเนตที่มีไทโรซีน ซึ่งมีหมู่คาร์บอกซิลเป็นหมู่ข้าง, พอลิ(ดีทีอี-โค-20%ดีที)คาร์บอเนต โดยผ่านปฏิกิริยา 2 ขั้นตอน ปฏิกิริยาในขั้นแรกเกี่ยวข้องกับการกระตุ้นหมู่คาร์บอกซิลด้วยเอ็น-ไฮดรอกซีซักซินิไมด์ (เอ็นเอชเอส) ในภาวะที่มี 1(-3-ไดเมทิลแอมิโนโพรพิล)-3-เอทิลคาร์ไบไดอิไมด์ ไฮโดรคลอไรด์ (อีดีซีไอ) ขั้นที่สองเป็นการติดอาร์จีดีเพปไทด์ด้วยพันธะโควาแลนต์ โดยติดตามความสำเร็จของการตรึงเพปไทด์ด้วยวิธีนินไฮดรินและเทคนิคเอ็กซ์เรย์โฟโตอิเล็กตรอนสเปกโทรสโกปี (เอ็กพีเอส) จากการใช้สารละลายเฮกซะเมทิลีน ไดแอมีนเป็นสารมาตรฐาน พบว่า สามารถคำนวณความหนาแน่นของหมู่แอมิโนได้ประมาณ8.07x10[superscript -8], 6.51x10[superscript -8], และ 5.13x10[superscript -8] โมล/ตารางเซนติเมตร สำหรับการตรึงด้วยอาร์จีดีเอส และจีอาร์ดีเอส ตามลำดับ และจากการวิเคราะห์ พื้นผิวของพอลิ(ดีทีอี-โค-20%ดีที)คาร์บอเนตที่ตรึงด้วยอาร์จีดีเพปไทด์หลังจากติดฉลากด้วยเฮปทาฟลูออโรบิวทิริลคลอไรด์ด้วยเทคนิคเอ็กพีเอส พบว่าได้เปอร์เซ็นต์การแทนที่ของ อาร์จีดีเอสและจีอาร์จีดีเอส เป็น 75 และ 30 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ จากผลการศึกษาความเข้ากันได้กับเซลล์ในห้องปฏิบัติการพบว่า จีอาร์จีดีเอสมีประสิทธิภาพสูงสุดในการเพิ่มการยึดเกาะและการแบ่งตัวของเซลล์ไฟโบรบลาสต์ (บี95) เมื่อเปรียบเทียบกับพอลิสไตรีนที่ใช้เลี้ยงเซลล์ (ทีซีพีเอส) ค่าสัดส่วนการยึดเกาะและการแบ่งตัวของเซลล์เพิ่มขึ้นจาก 92 และ 100 เปอร์เซ็นต์ เป็น 117 และ 129 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ หลังการตรึงด้วยจีอาร์จีดีเอส จากผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าหมู่ไกลซีนที่เพิ่มขึ้นมาทำให้เพปไทด์มีอิสระในการเคลื่อนที่ส่งผลให้ส่วนที่เป็นลำดับอาร์จีดีสามารถแสดงการตอบสนองต่อเซลล์อย่างจำเพาะเจาะจงได้อย่างมีประสิทธิภาพ
URI: http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/8297
Type: Technical Report
Appears in Collections:Sci - Research Reports

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
voravee_rgd.pdf1.03 MBAdobe PDFView/Open


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.