ผลของสารพวกซัลโฟนาไมด์ต่อไดไฮโดรพเทอโรเอท ซินเทส จาก Escherichia coli

นภาพร สายอุบล

Please use this identifier to cite or link to this item: https://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/10462

Full metadata record

DC Field	Value	Language
dc.contributor.advisor	วิชัย สุทธิมูล	-
dc.contributor.author	นภาพร สายอุบล	-
dc.contributor.other	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. บัณฑิตวิทยาลัย	-
dc.date.accessioned	2009-08-25T09:32:06Z	-
dc.date.available	2009-08-25T09:32:06Z	-
dc.date.issued	2526	-
dc.identifier.isbn	9745626872	-
dc.identifier.uri	http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/10462	-
dc.description	วิทยานิพนธ์ (วท.ม.)--จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย, 2526	en
dc.description.abstract	งานวิจัยนี้ได้ศึกษาผลการยับยั้งของสารพวกซัลโฟนาไมด์ 5 ชนิด ต่อการทำงานของไดไฮโดรพเทอโรเอท ซินเทส จาก Escherichia coli โดยการหาค่าของความเข้มข้นที่น้อยที่สุดที่ใช้ในการยับยั้งการเจริญเติบโตของแบคทีเรีย (MIC) ค่าของความเข้มข้นของซัลโฟนาไมด์ที่ใช้ในการยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ได้ 50 เปอร์เซนต์ (I50) และค่าคงที่ของการยับยั้ง (Ki) พบว่าค่าของ MIC ของ sulfanilamide ในอาหารเลี้ยงเชื้อแอลบี-บรอท เท่ากับ 4.30x10-2 โมล/ลิตร และในอาหารเลี้ยงเชื้อสูตรปรับต่ำกลูโคสค่า MIC ของ sulfanilamide และ p-aminobenzenesulfonamido-propyl bromide เท่ากับ 1.31x10-3 โมล/ลิตร และ 2.91x10-3 โมล/ลิตร ตามลำดับ จากการศึกษาค่า I50 ของซัลโฟนาไมด์ที่มีต่อ enzyme ที่ได้จากการตกตะกอนด้วยแอมโมเนียมซัลเฟตอิ่มตัว 20-60% พบว่าค่า I50 ของ sulfanilamide, N,N'-bis(sulfanilyl)-L-cystine, p-aminobenzenesulfonamidopropyl thiosulfate และ 4-(4-aminobenzenesulfonamido) benzenesulfonamidoglycine เท่ากับ 2.15x10-3, 3.23x10-3, 3.35x10-3 และ 2.70x10-5 โมล/ลิตร ตามลำดับ หลังจากทำเอนไซม์ให้บริสุทธิ์ขึ้นโดยวิธีแอฟฟินิตีโครมาโตรกราฟฟิ ปรากฏว่าได้ความบริสุทธิ์เพิ่มขึ้น 209 เท่า แต่อย่างไรก็ตามจากการทำอะไครลาไมด์เจลอิเลคโตรโรีซิสแบบแท่งพบว่า มีแถบของโปรตีน 7 แถบ อุณหภูมิที่เหมาะสมของการทำงานของเอนไซม์เท่ากับ 45-46 องศาเซลเซียส pH ที่เหมาะสมเท่ากับ 8.58 ค่า Km ของกรดพารา-อะมิโนเบนโซอิกเท่ากับ 2.86x10-5 โมล/ลิตร และค่า Ki ของ sulfanilamide, p-aminobenzenesulfonamidopropyl bromide, N,N'-bis(sulfanilyl)-L-cystine, p-aminobenzenesulfonamidopropyl thiosulfate และ 4-(4-aminobenzenesulfonamido) benzenesulfonamidoglycine เท่ากับ 4.30x10-4, 7.50x10-4, 3.50x10-4, 5.38x10-4 และ 7.50x10-6 โมล/ลิตร ตามลำดับ พบว่าการยับยั้งของสารพวกซัลโฟนาไมด์ทั้ง 5 ชนิด เป็นแบบแข่งขันกับกรดพารา-อะมิโนเบนโซอิก	en
dc.description.abstractalternative	Five sulfonamides were selected to study for their inhibitory activity against dihydropteroate synthase from Escherichia coli by measuring the minimum inhibitory concentration (MIC), the concentration required for 50% inhibition (I50) and the inhibitor constant (Ki). The MIC value for sulfanilamide was 4.30 x 10-2 mol/l when the LB broth was used as a nutrient medium. The MIC values for sulfanilamide and p-aminobenzenesulfonamidopropyl bromide were 1.31 x 10-3 mol/l and 2.91 x 10-3 mol/l, respectively, when the glucose minimum medium was used as a nutrient medium. The enzyme precipitated with 20-60% saturated ammonium sulfate was used for the determination of I50 and the I50 values for sulfanilamide, N,N'-bis(sulfanilyl)-L-cystine, p-aminobenzenesulfonamidopropyl thiosulfate and 4-(4-aminobenzenesulfonamido) benzenesulfonamido-glycine were found to be 2.15 x 10-3, 3.23 x 10-3, 3.35 x 10-3 and 2.70 x 10-5 mol/l, respectively. The purity of the enzyme was increased 209-fold after the affinity chromatography step, however, the enzyme showed seven bands of proteins by acrylamide gel electro-phoresis. The optimal pH and temperature of the enzyme were 8.58 and 45-46 C, respectively. The Km value for p-aminobenzoic acid was 2.86 x 10-5 mol/l. The Ki values for sulfanilamide, p-aminobenzenesulfonamidopropyl bromide, N,N'-bis(sulfanilyl)-L-cystine, p-aminobenzenesulfonamidopropyl thiosulfate and 4-(4-aminobenzenesulfonamido) benzenesulfonamidoglycine were 4.30 x 10-4, 7.50 x 10-4, 3.50 x 10-4, 5.38 x 10-4 and 7.50 x 10-6 mol/l, respectively. All five sulfonamides were competitive inhibitors with p-aminobenzoic acid.	en
dc.format.extent	15530575 bytes	-
dc.format.mimetype	application/pdf	-
dc.language.iso	th	es
dc.publisher	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย	en
dc.rights	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย	en
dc.subject	แบคทีเรีย	en
dc.subject	ซัลโฟนาไมด์	en
dc.subject	ไดไฮโดรพเทอโรเอทซินทาส	en
dc.title	ผลของสารพวกซัลโฟนาไมด์ต่อไดไฮโดรพเทอโรเอท ซินเทส จาก Escherichia coli	en
dc.title.alternative	Effect of sulfonamides on dihydropteroate synthase from Escherichia coli	en
dc.type	Thesis	es
dc.degree.name	วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต	es
dc.degree.level	ปริญญาโท	es
dc.degree.discipline	ชีวเคมี	es
dc.degree.grantor	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย	en
dc.email.advisor	ไม่มีข้อมูล	-
Appears in Collections:	Grad - Theses

Files in This Item:

File	Description	Size	Format
Napaporn_s.pdf		15.17 MB	Adobe PDF	View/Open

Show simple item record