จีโนเซนเซอร์ด้วยการตรวจสอบสีของอนุภาคเงินนาโนเพื่อใช้ในการสอบวิเคราะห์โรคชิคุนกุนยา

Abstract

โรคชิคุนกุนยาเป็นโรคอุบัติซ้ำสำคัญพบพื้นที่ภาคใต้ของประเทศไทย เกิดจากไวรัสชิคุนกุนยา(Chikungunya virus) โดยมียุงลายบ้าน(Aedes aegypti) และยุงลายสวน (Aedes albopictus) เป็นพาหะ โรคนี้จะมีอาการ ปวดข้อ ไข้สูงเฉียบพลัน มีผื่นแดงขึ้นตามร่างกายและมีลักษณะอาการของโรคคล้ายไข้เลือดออก จึงจำเป็นต้องมีการวินิจฉัยโรคที่แม่นยำ งานวิจัยนี้ได้ประยุกต์เทคนิคการเพิ่มดีเอ็นเอเป้าหมายที่อุณหภูมิเดี่ยวมาใช้ในการเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอให้ง่ายและรวดเร็วเพื่อลดข้อจำกัดในการพึ่งพาห้องปฏิบัติการ โดยออกแบบไพรเมอร์ให้จำเพาะกับยีน E1 ที่มีขนาด 205 นิวคลีโอไทด์ ร่วมกับการใช้อนาล็อกดีเอ็นเอโพรบที่เป็นคู่สมและสามารถจับกับดีเอ็นเอเป้าหมาย วิธีเพิ่มปริมาณสัญญาณดีเอ็นเอนี้สามารถเพิ่มปริมาณสารพันธุกรรมของไวรัสในระดับจำกัดหา LOD ได้ที่ 100 copies ให้ความจำเพาะต่อชิคุนกุนยาไวรัสและสามารถแยกความแตกต่างของผลการทดลองจากไวรัสชนิดอื่นได้แก่เดงกี่ไวรัส serotype 1-4, Plasmodium falsifarum, ไวรัสไข้หวัดใหญ่ H1N1 การพัฒนาการตรวจสอบสัญญาณโดยใช้อนุภาคนาโนเงิน เพื่อดูการเปลี่ยนแปลงสี (colorimetric detection) เกิดขึ้นเมื่อโพรบจับกับดีเอ็นเอเป้าหมาย การตรวจใช้เวลาทั้งหมด 1 ชั่วโมง แบ่งเป็นการเพิ่มปริมาณ 30 นาที และการตรวจสอบสัญญาณการเปลี่ยนแปลงสี 30 นาที เป็นวิธีที่ได้มีประสิทธิภาพ สามารถตอบสนองหลักการ point of care ได้ตามวัตถุประสงค์