การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อ Vibrio alginolyticus

Abstract

ได้ผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่จำเพาะต่อแบคทีเรีย Vibrio alginolyticus 14800, Y16 และ BY2 โดยใช้แบคทีเรียทั้งเซลล์เป็นแอนติเจน โมโนโคลนอลแอนติบอดีที่ผลิตได้มี 27 ชนิด สามารถแบ่งออกได้เป็น 13 กลุ่มตามความจำเพาะต่อแบคทีเรียที่ใช้ในการทดสอบและโปรตีนต่างๆ ในช่วง 7-300 กิโลดาลตัน แอนติบอดี 2 กลุ่มแรกเป็นแอนติบอดีที่มีความจำเพาะต่อสายพันธุ์ โดยมีความจำเพาะต่อ V. alginolyticus 14800 หรือ Y16 เพียงอย่างเดียวแต่ไม่จับกับ V. alginolyticus สายพันธุ์อื่น แอนติบอดี 2 กลุ่มนี้จับกับแถบของแอนติเจนซึ่งมีน้ำหนักโมเลกุลอยู่ในช่วง 12-25 กิโลดาลตัน หรือ 135 กิโลดาลตัน แอนติบอดีกลุ่มที่ 3 มีความจำเพาะกว้างกว่าแอนติบอดีใน 2 กลุ่มแรก โดยมีความจำเพาะต่อ V. alginolyticus Y16 และ BY2 และจับกับแถบของแอนติเจนซึ่งมีน้ำหนักโมเลกุลอยู่ในช่วง 7-15 กิโลดาลตัน แอนติบอดีกลุ่มที่ 4 และ 5 เป็นแอนติบอดีที่มีความจำเพาะต่อสปีชีส์ โดยมีความจำเพาะต่อ V. alginolyticus ทั้ง 3 สายพันธุ์ และจับกับแถบของแอนติเจนซึ่งมีน้ำหนักโมเลกุลประมาณ 10 กับ 20 และ 300 กิโลดาลตันตามลำดับ แอนติบอดีกลุ่มที่ 6 เป็นแอนติบอดีมีความจำเพาะต่อสกุล โดยมีความจำเพาะต่อแบคทีเรียในสกุลวิบริโอทุกชนิดที่ใช้ในการทดสอบ และจับกับแถบของแอนติเจนซึ่งมีน้ำหนักโมเลกุลประมาณ 50 กิโลดาลตัน ส่วนโมโนโคลนอลแอนติบอดีอีก 7 กลุ่มที่ผลิตได้แสดงปฏิกิริยาข้ามต่อ Vibrio spp. อื่นที่ใช้ในการทดสอบแตกต่างกันออกไป โมโนโคลนอลแอนติบอดีกลุ่มที่ 1 4 5 และ 6 สามารถตรวจติดตามการติดเชื้อ V. alginolyticus ในเนื้อเยื่อด้วยวิธี immunohistochemistry ได้ และสามารถใช้โมโนโคลนอลแอนติบอดีกลุ่มที่ 1 2 3 4 และ 5 จำแนกหรือแยกความแตกต่างระหว่างสายพันธุ์ของ V. alginolyticus ด้วยวิธี Dot blot ได้ ดังนั้นการศึกษาครั้งนี้ทำให้ได้วิธีทางอิมมูโนวิทยาที่ไม่เพียงแต่จำแนก V. alginolyticus เท่านั้นแต่ยังสามารถพิสูจน์ทราบสายพันธุ์ของ V. alginolyticusได้อีกด้วย และคาดว่าจะสามารถนำโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่ผลิตได้ ไปเตรียมเป็นชุดตรวจสำเร็จรูปสะดวกใช้ซึ่งมีความไวสูงเพื่อใช้วินิจฉัย V. alginolyticus ต่อไป