การควบคุมกระบวนการสังเคราะห์พอลิ-เบต้า-ไฮดรอกซีอัลคาโนเอทใน Alcaligenes eutrophus ATCC 17697

วนิดา วัฒนการุณ

Please use this identifier to cite or link to this item: https://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/23391

Full metadata record

DC Field	Value	Language
dc.contributor.advisor	สัณห์ พณิชยกุล
dc.contributor.author	วนิดา วัฒนการุณ
dc.contributor.other	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. บัณฑิตวิทยาลัย
dc.date.accessioned	2012-11-08T06:13:23Z
dc.date.available	2012-11-08T06:13:23Z
dc.date.issued	2536
dc.identifier.isbn	9745831506
dc.identifier.uri	http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/23391
dc.description	วิทยานิพนธ์ (วท.ม.)--จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย, 2536	en
dc.description.abstract	ทำการเพาะเลี้ยงเซลล์ Alcalligenes eutrophus ATCC 17697ในอาหารสูตรเกลือแร่ที่มีฟรุกโตสและแอมโมเนียมซัลเฟต เป็นแหล่งต้นตอคาร์บอนและไนโตรเจน เมื่อศึกษาเปรียบเทียบรูปแบบการเจริญและการผลิตพอลิ-เบต้า-ไฮดรอกซีบิวทิเรท ในอาหารสูตรเกลือแร่และอาหารสูตรอุดม พบว่าในอาหารสูตรเกลือแร่ ให้ปริมาณพอลิ-เบตา-ไฮดรอกซีบิวทิเรทสูงกว่าอย่างเห็นได้ชัด และขึ้นกับความเข้มข้นของ ฟรุกโตสและแอมโมเนียมซัลเฟตที่ใช้ ในขณะที่การเพาะเลี้ยงเชื้อในอาหารสูตรอุดมจะให้ปริมาณพอลิ-เบต้า-ไฮดรอกซีบิวทิเรทต่ำมาก ในการศึกษาเอนไซม์ 3 ชนิด (เบต้า-คีโตไธโอเลส, อะซิโตอะซิติลโคเอรีดักเตสและไฮดรอกซี บิวทิเรทดีไฮโดรจีเนส) ที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์พอลิ-เบตา-ไฮดรอกซีบิวทิเรทของ A.eutrophuในสภาวะของการสะสมพอลิ-เบตา-ไฮดรอกซีบิวทิเรท แตกต่างกัน พบว่าการเพาะเลี้ยงในอาหารสูตรเกลือแร่ที่มีปริมาณแอมโมเนียมซัลเฟตต่ำ (0.1 กรัมต่อลิตร) จะให้แอคติวิตีจำเพาะของเอนไซม์เบต้า-คีโตไธโอเลสและอะซิโตอะซิติลโคเอรีดักเตสสูงกว่า 4 และ 2 เท่าตามลำดับ ของที่เลี้ยงในอาหารสูตรเดียวกันที่มีแอมโมเนียมซัลเฟต2 กรัมต่อลิตร ขณะที่มีการสะสมของพอลิ-เบตา-ไฮดรอกซีบิวทิเรทเพิ่มขึ้นเพียง 2 เท่า เมื่อเติมอาหารสูตรอุดมลงในอาหารสูตรเกลือแร่ ทำให้ A. eutrophu เจริญเพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็ว แต่เป็นผลให้การสังเคราะห์พอลิ-เบตา-ไฮดรอกซีบิวทิเรท ลดลงอย่างชัดเจน เช่นเดียวกับแอคติวิตีจำเพาะของเอนไซม์ ทั้งสามชนิดที่มีค่าต่ำ ส่วนการเปรียบเทียบแอคติวิตีจำเพาะของเอนไซม์เบต้า-คีโตไธโอเลสและอิซิโตอะซิติลโคเอรีดักเตส เมื่อเพาะเลี้ยงในอาหารสูตรอุดม ที่ระยะการเจริญคงที่จะต่ำกว่าในอาหารสูตรเกลือแร่ที่มีแอมโมเนียมซัลเฟต 2 กรัมต่อลิตร ขณะที่แอคติวิตีจำเพาะของเอนไซม์ไฮดรอกซีบิวทิเรทดีไฮโดรจีเนสสูงกว่า 10 เท่า การศึกษาโคพอลิเอสเทอร์ของ 3-ไฮดรอกซีบิวทิเรท และ 3-ไฮดรอกซีวาเลอเรท ที่ A. eutrophus สังเคราะห์ พบว่าการเติมกรดบิวทิริคลงในอาหารสูตรเกลือแร่ ทำให้สัดส่วนของ 3-ไฮดรอกซีบิวทิเรท ต่อ 3-ไฮดรอกชีวาเลอเรทสูงขึ้น เช่นเดียวกับการที่แอคติวิตีจำเพาะของเอนไซม์เบต้า-คีโตไธโอเลสและอะซิโตอะซิติลโคเอรีดักเตส เพิ่มขึ้น 9-10 เท่า และ 3-4 เท่า ตามลำดับ เมื่อเปรียบเทียบกับอาหารสูตรเดียวกันที่ไม่เติมกรดบิวทิริค
dc.description.abstractalternative	Alcaligenes eutrophus ATCC 17697 was grown in mineral salts medium contained fructose and ammonium sulfate as a carbon and nitrogen source. The growth and poly-β-hydroxybutyrate synthetic pattern was compared to the cultivation in nutrient broth. In mineral salts medium the production of poly-β-hydroxybutyrate were significantly higher than the NB medium. The difference value highly depended on fructose and ammonium sulfate concentration. Very low concentration of poly-β-hydroxybutyrate was detected when the microorganism was grown in nutrient broth. Three enzymes activities (β-ketothiolase, acetoacetyl-CoA reductase and D(-)-3-hydroxybutyrate dehydrogenase) involving poly-β-hydroxybutyrate synthesis from A. eutrophus have been studies at the various conditions of the poly- β -hydroxybutyrate accumulation. The higher specific activity β -ketothiolase, acetoacetyl-CoA reductase were obtained from cells growing in the mineral salts medium at low concentration of ammonium sulfate (0.1 g/l) which synthesized 4 and 2 fold higher in specific activity of the enzymes than the medium with contained 2g/l ammonium sulfate, while only 2 fold higher in poly-β -hydroxybutyrate accumulation was observed. The addition of nutrient broth to the mineral salts medium caused a rapid increase in growth of A.eutrophus but strongly decreased the poly-β-hydroxybutyrate production, which were correlatively to the decreased of all three enzymes investigated significantly. Cells growing in nutrient broth culture produced very low specific activity of β-ketothiolase and acetoacetyl-CoA reductase at the stationary phase in comparison to the activities obtained from growing cells in 2 g/l ammonium sulfate. However, the specific activity of D(-)-3-hydroxybutyrate dehydrogenase in this rich medium was over 10 fold higher. Copolyesters of 3-hydroxybutyrate and 3-hydroxyvalerate were also identified in A. eutrophys. Addition of butyric acid can increase the proportion of 3-hydroxybutyrate to 3-hydroxyvalerate with corresponding to highly induction of β-ketothiolase and acetoacetyl-CoA reductase specific activity of 9-10 and 3-4 fold when cells were grown in the same mineral salts media.
dc.format.extent	4361124 bytes
dc.format.extent	4379277 bytes
dc.format.extent	4079281 bytes
dc.format.extent	9017978 bytes
dc.format.extent	6684445 bytes
dc.format.extent	4278608 bytes
dc.format.mimetype	application/pdf
dc.format.mimetype	application/pdf
dc.format.mimetype	application/pdf
dc.format.mimetype	application/pdf
dc.format.mimetype	application/pdf
dc.format.mimetype	application/pdf
dc.language.iso	th	es
dc.publisher	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย	en
dc.rights	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย	en
dc.title	การควบคุมกระบวนการสังเคราะห์พอลิ-เบต้า-ไฮดรอกซีอัลคาโนเอทใน Alcaligenes eutrophus ATCC 17697	en
dc.title.alternative	Regulation of poly-B-hydroxyalkanoate synthesis in Alcaligenes eutrophus ATCC 17697	en
dc.type	Thesis	es
dc.degree.name	วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต	es
dc.degree.level	ปริญญาโท	es
dc.degree.discipline	เทคโนโลยีชีวภาพ	es
dc.degree.grantor	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย	en
Appears in Collections:	Grad - Theses

Files in This Item:

File	Size	Format
Wanida_wa_front.pdf	4.26 MB	Adobe PDF	View/Open
Wanida_wa_ch1.pdf	4.28 MB	Adobe PDF	View/Open
Wanida_wa_ch2.pdf	3.98 MB	Adobe PDF	View/Open
Wanida_wa_ch3.pdf	8.81 MB	Adobe PDF	View/Open
Wanida_wa_ch4.pdf	6.53 MB	Adobe PDF	View/Open
Wanida_wa_back.pdf	4.18 MB	Adobe PDF	View/Open

Show simple item record