การสร้างและการหลอมโพรโทพลาสต์ในไรโซเบียม บางสายพันธุ์

Abstract

TAL 141 ure his เป็นสายพันธุ์ไรโซเบียมเติบโตเร็วที่สามารถทนความเครียด ส่วน USDA 192 Trp Phe เป็น Rhizobium fredii และไม่สามารถทนความเครียด ได้นำสายพันธุ์ทั้งสองมาสร้างโพรโทพลาสต์ พบว่าการเติมไกลซีนที่ความเข้มข้นเหมาะสม จะช่วยให้ได้เซลล์ที่เตรียมโพรโทพลาสต์ได้ในเปอร์เซ็นต์สูง นอกจากนี้ยังพบว่าการเกิดโพรโทพลาสต์ปริมาณสูงสุดของ TAL 141 ure his ได้ผลเมื่อให้ไลโซไซม์ทำงานร่วมกับ GEDTA ในขณะที่ USDA 192 Trp Phe ต้องการไลโซไซม์ร่วมกับ EDTA ได้หลอมโพรโทพลาสต์โดยใช้ 15% PEG 6000 ที่ 42°ซ 5 นาทีเลือกโคโลนีที่สามารถเจริญได้ในอาหารสูตรปรับต่ำมาทำการแยกให้บริสุทธิ์ โดยมีความถี่ในการเกิดฟิวแซนต์ประมาณ 3.6x10⁻⁶ต่อเซลล์ ได้เลือกสายพันธุ์ชื่อ F11, F14, F15, F20 และ F36 เป็นตัวแทนในการศึกษา จากการศึกษาการเจริญในสภาวะที่กำหนด การทดสอบอิมมูโนวิทยาของฟิวแซนต์ การทดสอบรูปแบบของโครโมโซมที่ถูกย่อยด้วยเรสทริกซันเอนไซม์ และการสร้างปมของไรโซเบียมกับต้นถั่ว สรุปได้ว่า ทั้งห้าสายพันธุ์ควรเป็นฟิวแซนต์ดังต่อไปนี้ F11 เป็นอนุพันธ์ของ TAL 141 ส่วน F15, F20, และ F36 เป็นอนุพันธ์ของไรโซเบียมสายพันธุ์ USDA 192 โดยแต่ละสายพันธุ์จะมีการแลกเปลี่ยนยีน อย่างน้อยหนึ่งตำแหน่ง ยกเว้น F15 แสดงสรีรสมบัติเปลี่ยนแปลงพร้อมๆ กันถึงสี่ประการ สมบัติทางชีวภาพหลายอย่างที่แตกต่างเป็นอิสระจากไรโซเบียมสายพันธุ์พ่อแม่ ซึ่งแสดงว่ามีระคอมบิเนชันระหว่างสายพันธุ์เกิดขึ้นหลายตำแหน่ง