Biologically active compounds from endophytic fungi in Croton sublyratus Leaves

Abstract

งานวิจัยนี้ทำการแยกสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่สร้างจากราเอนโดไฟต์ที่แยกได้จากใบเปล้าน้อย Croton sublyratus โดยนำส่วนของใบ จาก 4 แหล่งตัวอย่าง มาคัดแยกราโดยผ่านวิธีฆ่าเชื้อที่ผิวภายนอก และวางบน malt extract agar สามารถแยกราได้ทั้งหมด 75 ไดโซเลต จากการทดสอบเบื้องต้นในกาสร้างสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพของราเอนโดไฟต์ในการยับยั้งจุลินทรีย์ทดสอบโดยวิธี Dual culture agar diffusion technique พบว่าราเอนโดไฟต์ไอโซเลต CsPr03 สามารถสร้างสารที่มีฤทธิ์ทางชีวภาพในการยับยั้งจุลินทรีย์ทดสอบได้ดีที่สุด เมื่อทำการจัดจำแนกสายพันธุ์โดยศึกษาลักษณะทางสัณฐานวิทยาและวิเคราะห์ลำดับนิวคลีโอไทด์ในบริเวณ internal transcribed spacer ของ rDNA พบว่าราเอนโดไฟต์ไอโซเลต CsPr03 คือ Bipolaris spicifera เมื่อทำการศึกษาเพื่อหาสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพโดยเลี้ยงในอาหารเหลว malt extracts broth ยแกสารบริสุทธิ์ จากน้ำหมักด้วยวิธีโครมาโตกราฟีและการตกผลึก และหาสูตรโครงสร้างของสารดังกล่าว โดยอาศัยสมบัติทางกายภาพและเทคนิคทางสเปกโตสโกปี พบว่า ได้สารบริสุทธิ์ชนิดที่ 1 คือ Curvulin, สารบริสุทธิ์ชนิด ที่ 2 คือ Emodin และ สารบริสุทธิ์ชนิดที่ 3 คือ สาร curvulin สังเคราะห์ นำสารบริสุทธิ์ที่แยกได้มาทดสอบฤทธิ์ทาชีวภาพในการยับยั้งจุลินทรีย์ทดสอบพบว่า สารบริสุทธิ์ชนิดที่ 1 คือ Curvulin มีฤทธิ์ยับยั้ง Bacillus subtilits ATCC 6633, Saccharomyces cerevisiar TISTR 5169 โดยมีค่า MIC เท่ากับ 15.62 และ 500 µg/ml ตามลำดับส่วน สารบริสุทธิ์ชนิดที่ 2 คือ Emodin มีฤทธิ์ยับยั้ง Candida albicans ATCC 10231 โดยมีค่า MIC เท่ากับ 500 µg/ml. และสารชนิดที่ 3 มีฤทธิ์ในการยับยั้งเชื้อ Staphylococcus aureus ATCC 25923 ที่ความเข้มข้นต่ำสุด 125 µg/ml.