Please use this identifier to cite or link to this item:
https://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/50055
Full metadata record
| DC Field | Value | Language |
|---|---|---|
| dc.contributor.advisor | รุ่งอรุณ วาดิถี สิริศรัทธา | en_US |
| dc.contributor.author | วิภาพร ชีวินธำรงโรจน์ | en_US |
| dc.contributor.other | จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. คณะวิทยาศาสตร์ | en_US |
| dc.date.accessioned | 2016-11-30T05:41:57Z | - |
| dc.date.available | 2016-11-30T05:41:57Z | - |
| dc.date.issued | 2558 | en_US |
| dc.identifier.uri | http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/50055 | - |
| dc.description | วิทยานิพนธ์ (วท.ม.)--จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย, 2558 | en_US |
| dc.description.abstract | ไมโคสปอรีน-ไลค์ อะมิโน แอซิด (mycosporine-like amino acids, MAAs) เป็นสารกรองรังสียูวีโมเลกุลขนาดเล็ก โดย MAAs ถูกสร้างขึ้นภายใต้การปรับตัวจากผลกระทบที่ทำให้เกิดความเสียหายเนื่องมาจากรังสียูวีและความเครียดภายนอก ในงานวิจัยครั้งนี้ใช้ Escherichia coli DH5α เป็นเจ้าบ้านเพื่อแสดงออกกลุ่มยีนชีวสังเคราะห์ไมโคสปอรีน-2-ไกลซีน (Ap3858 ถึง Ap3855) ในการศึกษาอัตราการรอดชีวิต พบว่าไมโคสปอรีน-2-ไกลซีนสะสมและแสดงออกของยีนภายใต้ภาวะความเครียดต่างๆ ซึ่งแสดงให้เห็นว่าเซลล์แสดงออกรอดชีวิตมากกว่าเซลล์ควบคุมจากภายใต้ภาวะความเครียดทั้งหมดที่ศึกษา ชีวสังเคราะห์ไมโคสปอรีน-2-ไกลซีนเกิดขึ้นเฉพาะภายใต้ความเครียดจากเกลือโซเดียมคลอไรด์และเกลือโปแตสเซียมคลอไรด์ จากการวิเคราะห์ด้วยวิธีกึ่งหาปริมาณอาร์ที-พีซีอาร์ พบว่ายีน Ap3858 ถึง Ap3855 มีการแสดงที่เพิ่มขึ้นภายใต้ภาวะความเครียดดังกล่าว นอกจากนี้ยังทำการวิเคราะห์การป้องกันของไมโคสปอรีน-2-ไกลซีนทั้งใน in vitro และ in vivo การศึกษาฤทธิ์ต้านออกซิเดชันด้วยเทคนิค DPPH (in vitro) โดยไมโคสปอรีน-2-ไกลซีนมีการยับยั้งอย่างมีนัยสำคัญที่ค่า SC50 เท่ากับ 22 ± 1.4 ไมโครโมลาร์ การวิเคราะห์ด้วย in vivo โดยใช้เซลล์ไลน์เมลาโนซัยต์ของมนุษย์ A-375 พบว่าไมโคสปอรีน-2-ไกลซีนที่ความเข้มข้นต่ำสามารถปกป้องเซลล์จากภาวะความเครียดจากออกซิเดชันซึ่งเหนี่ยวนำด้วยไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ นอกจากนี้เมื่อตรวจสอบความเสียหายดีเอ็นเอทั้งหมด (DNA strand breaks) ในเซลล์ A-375 ด้วยการวิเคราะห์โคเมท พบว่าไมโคสปอรีน-2-ไกลซีนไม่ได้ส่งผลต่อการเปลี่ยนแปลงที่สารพันธุกรรม ส่วนความเสียหายดีเอ็นเอเกิดขึ้นได้ในเซลล์ที่มีการเติมความเข้มข้นต่ำของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ เมื่อใส่ร่วมกัน แสดงให้เห็นว่าไมโคสปอรีน-2-ไกลซีนมีฤทธิ์ต้านออกซิเดชันที่แรง | en_US |
| dc.description.abstractalternative | Mycosporine-like amino acids (MAAs) are ultraviolet (UV)-absorbing small molecules. MAAs are synthesized upon the adaptation from detrimental effect of solar UV-radiation and abiotic stresses. In this study, Escherichia coli DH5α expressing a cluster of genes for mycosporine-2-glycine biosynthesis (Ap3858 to Ap3855) was used to assess the survival rate, mycosporine-2-glycine accumulation and gene expression under various stress conditions. It was clearly shown that expressing cells could survive much better than control cells under all condition tested. Mycosporine-2-glycine was specifically biosynthesized under NaCl and KCl stresses. Semiquantitative RT-PCR revealed that Ap3858-3855 genes were up-regulated under these stresses. We further analyzed protective effect of mycosporine-2-glycine both in vitro and in vivo. In vitro antioxidant activity of mycosporine-2-glycine was performed by DPPH assay. Mycosporine-2-glycine exhibited a significant inhibition with SC50 value was 22 ± 1.4 µM. In vivo assay using human melanoma A-375 cell lines showed mycosporine-2-glycine at low concentration protected the cells from oxidative stress induced by H2O2. Moreover, total DNA strand breaks in the A-375 cells were analyzed using a Comet assay. It was evident that mycosporine-2-glycine was not genotoxic, while obvious DNA strand breaks could be observed in the cells treated with very low concentrations of H2O2. Taken together, suggest that mycosporine-2-glycine has a strong antioxidant property. | en_US |
| dc.language.iso | th | en_US |
| dc.publisher | จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย | en_US |
| dc.rights | จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย | en_US |
| dc.title | การเหนี่ยวนำการสะสมไมโคสปอรีน-2-ไกลซีน ใน Escherichia coli DH5α และฤทธิ์ต้านออกซิเดชัน | en_US |
| dc.title.alternative | INDUCTION OF MYCOSPORINE-2-GLYCINE ACCUMULATION IN Escherichia coli DH5α AND ANTIOXIDANT ACTIVITY | en_US |
| dc.type | Thesis | en_US |
| dc.degree.name | วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต | en_US |
| dc.degree.level | ปริญญาโท | en_US |
| dc.degree.discipline | เทคโนโลยีชีวภาพ | en_US |
| dc.degree.grantor | จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย | en_US |
| dc.email.advisor | Rungaroon.W@chula.ac.th,rungaroon.w@chula.ac.th | en_US |
| Appears in Collections: | Sci - Theses | |
Files in This Item:
| File | Description | Size | Format | |
|---|---|---|---|---|
| 5672232023.pdf | 5.47 MB | Adobe PDF | View/Open |
Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.