การคัดแยกเห็ดราที่ผลิตเอนไซม์ฟีนอลออกซิเดส

Abstract

การเก็บตัวอย่างเห็ดรากลุ่มไวท์รอทในวงศ์ Ganodermataceae ในพื้นที่สำรวจ 9 จังหวัดของประเทศไทย พบเห็ดราจำนวน 24 ตัวอย่าง ใน 2 สกุล ได้แก่ สกุล Ganoderma และสกุล Amauroderma ในสกุล Ganoderma พบ 23 ตัวอย่าง ดังนี้ Ganoderma sp (5 ตัวอย่าง) G. lucidum (7 ตัวอย่าง) G. applanatum (2 ตัวอย่าง) G. fulvellum (2 ตัวอย่าง) G. brownii (2 ตัวอย่าง) และชนิดละ 1 ตัวอย่างคือ G. shandongense G.kunmingense G. multiplicatum G. gibbosum และG. hainanense ในสกุล Amauroderma พบ 1 ตัวอย่างคือ Amauroderma rugosum การศึกษาการเจริญของเส้นใยในอาหารสูตร PDB ค่าความเป็นกรดด่าง 5.0 แสดงให้เห็นว่าเส้นใยทุกตัวอย่างเจริญได้ดีที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส การตรวจสอบการผลิตเอนไซม์ในกลุ่มฟีนอลออกซิเดสโดยการใช้สารละลายเคมี พบว่าเห็ดราที่คัดแยกส่วนใหญ่ให้ผลทดสอบบวกต่อเอนไซม์แลคเคสและเอนไซม์เพอร์ออกซิเดส การตรวจสอบประสิทธิภาพในการย่อยสลายลิกนินในขี้เลื่อยไม้ยูคาลิปตัส จากสายพันธุ์ที่คัดเลือก ระยะเวลา 1 เดือน พบว่า G. gibbosum LP2 G. brownii KH2 และ G. lucidum BK2 สามารถลดปริมาณลิกนินได้สูงสุด 16.52 19.49 เปอร์เซ็นต์ เมื่อทำการผลิตเอนไซม์ฟีนอลออกซิเดส (แลคเคส และแมงกานีส เพอร์ออกซิเดส) จากเห็ดรา 3 ชนิด โดยใช้ guaiacol ความเข้มข้น 4 ไมโครโมล เป็นตัวชักนำ และฟองน้ำสังเคราะห์เป็นวัสดุยึดเกาะของเส้นใย ภายใต้ภาวะเขย่าที่ 120 รอบต่อนาที อุณหภูมิ 30 +- 2 องศาเซลเซียส ให้ค่าแอคติวิตีของเอนไซม์แลคเคส และเอนไซม์แมงกานีส เพอร์ออกซิเดส เท่ากับ 1.608 X 10[superscript 4] U/ml และ 2.532 X 10[superscript 4] U/ml สำหรับ G. brownii KH2 0.474 X 10[superscript 4] U/ml และ 2.052 X 10[superscript 4] U/ml สำหรับ G. gibbosum LP2 1.080 X 10-4 U/ml และ 5.244 X 10[superscript 4] U/ml สำหรับ G. lucidum BK2 ตามลำดับ การทำเอนไซม์ให้บริสุทธิ์บางส่วนโดยการตกตะกอนด้วยแอมโมเนียมซัลเฟต (60-80 %w/v) จากเห็ดรา 3 ชนิดให้ค่าแอคติวิตีของเอนไซม์แลคเคสเพิ่มขึ้น 6.06-9.38 เท่า และค่าแอคติวิตีของเอนไซม์แมงกานีส เพอร์ออกซิเดสเพิ่มขึ้น 3.34-10.99 เท่า