การผลิตเซลลูโลสจาก Acetobacter xylinum ในถังหมักที่มีระบบกวนขนาด 5 ลิตร

Abstract

Acetobacter xvlinum จะมีการเจริญไปพร้อมกับการสร้างเซลลูโลสทำให้เป็นอุปสรรคต่อการเตรียมเซลล์แขวนลอยจากเชื้อที่เลี้ยงบนอาหารแข็งลาดเอียง เพราะเซลล์ส่วนมากจะเกาะติดกับแผ่นเซลลูโลส ในงานวิจัยนี้พบว่าสามารถเลี้ยงเซลล์บนอาหารแข็งลาดเอียงโดยไม่มีการสร้างเซลลูโลสได้โดยการเลี้ยงบนอาหารที่มีกลีเซอรอล l เปอร์เซ็นต์ (W/V) เป็นสารแหล่งคาร์บอน ส่วนการเลี้ยงเซลล์ด้วยอาหารเหลวในระดับขวดเขย่าเพื่อเตรียมหัวเชื้อนั้นสามารถระงับการสร้างเซลลูโลสได้โดยการเติม 0.18 หน่วยของเอมไซม์เซลลูโลสลงในอาหารเลี้ยงเชื้อ 50 มิลลิลิตร การผลิตเซลลูโลสให้อยู่ในรูปเม็ด (pellet) ต้องเลี้ยง A.xylinum ในถังหมักที่มีระบบการกวนเท่านั้นจะเลี้ยงในขวดเขย่าไม่ได้ จากงานวิจัยนี้พบว่าองค์ประกอบและปริมาณของสารอาหารที่เหมาะสมสำหรับการผลิตเซลลูโลสในอาหาร 1 ลิตรประกอบด้วยกลูโคส 20 กรัมม สารสกัด จากยีสต์ 6 กรัมม เปปโตน 3 กรัม, แมกนีเซียมซัลเฟต 2 กรัม, แอมโมเนียซัลเฟต 5 กรัม, โพแทสเซียมไดไฮโดรเจนฟอสเฟต 3 กรัม เมื่อเลี้ยง A-xylinum ด้วยอาหารดังกล่าวในถึงหมัก 5 ลิตร ที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส อัตราการกวน 500 รอบต่อนาที อัตราการให้อากาศ 1 vvm เป็นเวลา 28 ชั่วโมง จะได้เซลลูโลส 5.52 กรัมต่อลิตรหรือเมื่อเลี้ยงตามสภาวะดังกล่าวข้างต้นแต่เติมน้ำตาลเข้าไปในถังหมักในชั่วโมงที่ 24 และรักษาระดับน้ำตาลไว้ประมาณ 8 กรัมต่อลิตร จะได้เซลลูโลส 8.15 กรัมต่อลิตรที่ชั่วโมงที่ 36 ของการหมัก