การผลิตและลักษณะสมบัติของโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่ออะฟลาทอกซินเอ็ม1

อภิญญา แสงดอกไม้

Please use this identifier to cite or link to this item: https://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/28170

Full metadata record

DC Field	Value	Language
dc.contributor.advisor	กิตตินันท์ โกมลภิส	-
dc.contributor.advisor	ธนาภัทร ปาลกะ	-
dc.contributor.author	อภิญญา แสงดอกไม้	-
dc.contributor.illustrator	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. คณะวิทยาศาสตร์	-
dc.date.accessioned	2012-12-26T08:59:59Z	-
dc.date.available	2012-12-26T08:59:59Z	-
dc.date.issued	2554	-
dc.identifier.uri	http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/28170	-
dc.description	วิทยานิพนธ์ (วท.ม.)--จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย, 2554	en
dc.description.abstract	อะฟลาทอกซินเอ็ม1 (AFM₁) เป็นแมทาบอไลต์ที่ถูกเติมหมู่ไฮดรอกซิลของอะฟลาทอกซินบี1 (AFB₁) ทนต่อการให้ความร้อน เช่น การพาสเจอร์ไรส์ (pasteurization) AFM₁ เป็นที่รู้จักกันว่าเป็นสารพิษต่อเซลล์ตับและเป็นสารก่อมะเร็ง ดังนั้นการตรวจหาปริมาณของ AFM₁ ที่มีอยู่ในผลิตภัณฑ์นมจึงมีความจำเป็น งานวิจัยนี้จึงมีวัตถุประสงค์ในการผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อ AFM₁ เพื่อใช้ในการพัฒนาชุดตรวจด้วยวิธี ELISA ต่อไป โดยทำการฉีดแอนติเจน AFM₁ ที่เชื่อมต่อกับ BSA เพื่อทำการกระตุ้นภูมิคุ้มกันของหนูไมซ์สายพันธ์ BALB/c จำนวน 5 ตัว พบว่าหนูทุกตัวตอบสนองต่อแอนติเจน โดยมีค่าระดับแอนติบอดีในเลือด ระหว่าง 8,192,000 และ 32,768,000 เมื่อทำการหลอมรวมเซลล์ม้ามของหนูไมซ์กับเซลล์มัยอีโลมา P3X พบว่าได้โมโนโคลน จำนวน 5 โคลน ได้แก่ AFM₁-1, AFM₁-3, AFM₁-9, AFM₁-15 และ AFM₁-17 แอนติบอดีที่ได้มีไอโซไทป์เป็นชนิด IgG₁ ทั้งหมด ความไวซึ่งจะวัดในรูปของค่าความเข้มข้นของสารที่ต่ำที่สุดที่สามารถตรวจวัดได้ มีค่าเท่ากับ 16, 15, 5, 7 และ 8 พิโคกรัมต่อมิลลิลิตร ตามลำดับ โมโนโคลนอลแอนติบอดีเกิดปฏิกิริยาข้ามกับ AFB1 และ AFG₁ แต่ไม่เกิดปฏิกิริยาข้ามกับสารนอกกลุ่มที่ใช้ทดสอบ ดังนั้นโมโนโคลนอลแอนติบอดีเหล่านี้ จึงมีศักยภาพในการนำไปใช้พัฒนาชุดตรวจสอบโดยใช้หลักการทางภูมิคุ้มกันวิทยาสำหรับตรวจวัด AFM₁ ได้	en
dc.description.abstractalternative	Aflatoxin M₁ (AFM₁) is the hydroxylated metabolites of aflatoxin B1 (AFB₁) and stable during heat treatments like pasteurization. AFM₁ is known to be a hepatotoxic and carcinogenic agent. Therefore, detection of AFM₁ presented in dairy products is essential. The aim of this work was to generate monoclonal antibodies against AFM₁ for future development of ELISA detection test kit. AFM₁-BSA conjugate was used as an immunogen to immunize five BALB/c mice. All mice responded vigorously to AFM₁ which yielded the antiserum titer between 8,192,000 and 32,768,000. Splenocytes from these mice were fused with P3X myeloma cells to generate hybridoma, yielding five monoclones including AFM₁-1, AFM₁-3, AFM1-9, AFM1-15 and AFM1-17. Isotype of all monoclonal antibodies were IgG₁. Their sensitivity, which was calculated in term of limit of detection, was 16, 15, 5, 7 and 8 pg/ml, respectively. The monoclonal antibodies showed strong cross reactivity with AFB₁ and AFG₁ but the cross reactivities to other substances unrelated to aflatoxins were negligible. Thus, these monoclonal antibodies have a potential to be used in the development of an immunoassay-based test kit for detecting AFM₁	en
dc.format.extent	1545773 bytes	-
dc.format.mimetype	application/pdf	-
dc.language.iso	th	es
dc.publisher	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย	en
dc.relation.uri	http://doi.org/10.14457/CU.the.2011.1477	-
dc.rights	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย	en
dc.subject	อะฟลาท็อกซิน	en
dc.subject	โมโนโคลนอลแอนติบอดี	en
dc.title	การผลิตและลักษณะสมบัติของโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่ออะฟลาทอกซินเอ็ม1	en
dc.title.alternative	Production and characterization of monoclonal antibodies against Aflatoxin m1	en
dc.type	Thesis	es
dc.degree.name	วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต	es
dc.degree.level	ปริญญาโท	es
dc.degree.discipline	เทคโนโลยีชีวภาพ	es
dc.degree.grantor	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย	en
dc.email.advisor	kittinan.k@chula.ac.th	-
dc.email.advisor	Tanapat.P@Chula.ac.th	-
dc.identifier.DOI	10.14457/CU.the.2011.1477	-
Appears in Collections:	Sci - Theses

Files in This Item:

File	Description	Size	Format
apinya_sa.pdf		1.51 MB	Adobe PDF	View/Open

Show simple item record