การพัฒนาชุดตรวจสอบเตตราไซคลิน โดยวิธีเอนไซม์ลิงค์อิมมูโนซอร์เบนท์เอสเสย์

Abstract

เตตราไซคลิน (TC) เป็นสารปฏิชีวนะที่มีขอบเขตการออกฤทธิ์ในวงกว้างในการยับยั้งการเจริญของแบคทีเรียก่อโรคชนิดแกรมบวกและแกรมลบ มีการนำมาใช้อย่างแพร่หลายในปศุสัตว์ เพื่อป้องกันและรักษาโรคติดเชื้อ จึงนำไปสู่การตกค้างของ TC ในผลิตภัณฑ์ที่ได้จากสัตว์ได้เพื่อความปลอดภัยของผู้บริโภคในหลายประเทศจึงมีการกำหนดค่า MRL ของ TC เทคนิค ELISA เป็นเทคนิคที่นิยมใช้ในการตรวจ TC ที่ง่าย รวดเร็ว มีความแม่นยำสูงและความจำเพาะสูง จากการทดลองเปรียบเทียบชุดตรวจสอบ 3 แบบ ที่พัฒนาขึ้น โดยใช้โมโนโคลนนอลแอนติบอดี MAb-12-3F) พบว่า biotin-indirect competitive ELISA เป็นชุดตรวจสอบต้นแบบที่เหมาะสมที่สุด มีค่าเฉลี่ย IC₅₀ และปริมาณต่ำที่สุดที่ตรวจวัดได้ (LOD) เท่ากับ 2.63 และ 0.19 ppb ตามลำดับ โดยสามารถตรวจหา TC ในช่วง 2.5 ถึง 100 ng/ml นอกจากนั้นพบว่าชุดตรวจสอบต้นแบบที่ได้มีปฏิกิริยาข้ามต่อสารกลุ่ม TC ในช่วง 19-86% โดยไม่เกิดปฏิกิริยาข้ามกับสาร นอกกลุ่มที่นำมาทดสอบ เมื่อนำชุดตรวจสอบต้นแบบไปทดสอบกับตัวอย่างน้ำผึ้ง พบว่าได้ %recovery อยู่ในช่วง 85-99% และ % CV อยู่ในช่วง 3-16% ดังนั้นจากผลจากวิจัยพบว่าชุดตรวจสอบต้นแบบที่พัฒนาขึ้นสามารถนำไปใช้ในการวิเคราะห์หาปริมาณ TC ที่ตกค้างในน้ำผึ้งได้อย่างถูกต้องและมีประสิทธิภาพ