การสกัดแยกเฮปารินจากเนื้อเยื่อสัตว์ : รายงานผลการวิจัยฉบับสมบูรณ์

Abstract

จากการศึกษาปัจจัยต่าง ๆ พบว่า เนื้อเยื่อสัตว์ที่เหมาะสมจะนำมาสกัดแยกเฮปาริน ได้แก่ เนื้อเยื่อปอดสุกร กระบวนการสกัดเฮปารินจากเนื้อเยื่อปอดสุกร ประกอบด้วย 1) การออโตไลซิสเนื้อเยื่อ 2) การย่อยเนื้อเยื่อด้วยเอนไซม์นิวเทรส 3) การตกตะกอนสารเจือปนด้วยกรดไตรคลอโรอะซิติค 4) การกำจัดสารที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำกว่า 3,000 ดาลตัน ด้วยวิธีอัลทราฟิวเทรชัน 5) การตกตะกอนลำดับส่วนไกลโคอะมิโนไกลแคนประเภทต่าง ๆ ที่เจือปน รวมทั้งเฮปารินด้วยสารละลายเอธานอลในน้ำ และ 6) การทำเฮปารินที่สกัดได้ให้บริสุทธิ์ยิ่งขึ้น โดยวิธีแอนไอออนเอกซ์เซนจ์โครมาโตกราฟี พบว่า เฮปารินที่ได้มีค่าต่อต้านการแข็งตัวของเลือดแบบแอนตีแฟกเตอร์เทนเอ (Anti Factor Xa) เท่ากับ 143.21 ยูนิตต่อมิลลิกรัม ด้วยกระบวนการนี้สามารถสกัดเฮปารินได้ 18.20 มิลลิกรัม (2,606.42 ยูนิต) จากเนื้อเยื่อปอดสุกร 1 กิโลกรม (น้ำหนักเปียก) นอกจากนั้นได้ทำการตรวจสอบโครงสร้างทางเคมีของเฮปารินที่สกัดได้ โดยวิธีนิวเคลียร์แมคเนติคเรโซแนนซ์สเปกโตรสโคปี และวิเคราะห์อัตราส่วนองค์ประกอบธาตุ พบว่า มีไนโตรเจน 4.63% คาร์บอน 48.86% ไฮโดรเจน 9.31% และซัลเฟอร์ 37.20% และจากการหาน้ำหนักโมเลกุลด้วยวิธีไซส์เอกซ์คลูชันโครมาโตกราฟี พบว่า เฮปารินที่ได้มีน้ำหนักโมเลกุล 4,500 ดาลตัน