dc.contributor.advisor |
Vipavee P. Hoven |
|
dc.contributor.author |
Adisorn Poopattanapong |
|
dc.contributor.other |
Chulalongkorn University. Faculty of Sceince |
|
dc.date.accessioned |
2012-11-23T07:26:25Z |
|
dc.date.available |
2012-11-23T07:26:25Z |
|
dc.date.issued |
2004 |
|
dc.identifier.isbn |
9741767404 |
|
dc.identifier.uri |
http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/25583 |
|
dc.description |
Thesis (M.Sc.)--Chulalongkorn University, 2004 |
en |
dc.description.abstract |
This research has focused on chemical immobilization of RGD-containing peptides (RGD, RGDS, GRGDS) on the surface of tyrosine-derived polycarbonates having carboxyl pendant groups, poly(DTE-co¬-20%DT carbonate) through a two-step reaction. The first step involved an activation of carboxyl groups by N-hydroxysuccinimide (NHS) in the presence of 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride (EDCI). The second step was a covalent attachment of RGD-containing peptides. The success of peptide immobilization was determined by ninhydrin method and x-ray photoelectron spectroscopy (XPS). Using hexamethylenediamine as a standard, the grafting density of ~ 8.07 x 10⁻⁸, 6.51 x 10⁻⁸ ,and 5.13 x 10⁻⁸ mol/cm² were estimated for immobilization of RGD, RGDS, and GRGDS, respectively. According to XPS analysis of RGD-immobilized poly(DTE-co-20%DT carbonate) surface after labeling with heptafluorobutyryl chloride, 30 and 74% substitution were calculated for immobilization of RGDS and GRGDS, respectively. Results from in vitro cell studies demonstrated that among all studied RGD-containing peptides, GRGDS can best enhance fibroblast (B95) adhesion and proliferation on the polymer surface. Taking 100% of TCPS as a positive control, cell adhesion ratio and proliferation ratio were elevated from 92 and 100% of the virgin polymer to 117 and 129% respectively, after GRGDS immobilization. Evidently, the extra glycine spacer introduces the flexibility to the peptide and thus allows the RGD part to effectively mediate its specific response to the cells. |
|
dc.description.abstractalternative |
งานวิจัยนี้เป็นการศึกษาการตรึงทางเคมีของเพปไทด์ที่มีลำดับกรดแอมิโนอาร์จีดี (อาร์จีดีอาร์จีดีและจีอาร์จีดีเอส) บนพื้นผิวของพอลิคาร์บอเนตที่มีไทโรซีน ซึ่งมีหมู่คาร์บอกซิลเป็นหมู่ข้าง พอลิ(ดีทีอี-โค-20%ดีที)คาร์บอเนต โดยผ่านปฏิกิริยา 2 ขั้นตอน ปฏิกิริยาในขั้นแรกเกี่ยวข้องกับการกระตุ้นหมู่คาร์บอกซิลด้วยเอ็น-ไฮดรอกซีซักซินิไมด์ (เอ็นเอชเอส) ในภาวะที่มี 1-(3-ไดเมทิลแอมิโพรพิล)-3-เอทิลคาร์โบไดอิไมด์ ไฮโดรคลอไรด์ (อีดีซีไอ) ขั้นที่สองเป็นการติดอาร์จีดีเพปไทด์ด้วยพันธะโควาเลนต์ โดยติดตามความสำเร็จของการตรึงเพปไทด์ด้วยวิธีนินไฮดรินและเทคนิคเอ็กซ์เรย์โฟโตอิเล็กตรอนสเปกโทรสโกปี (เอ็กพีเอส) จากการใช้สารละลายเฮกซะเมทิลีนไดแอมีนเป็นสารมาตรฐานพบว่าสามารถคำนวณความหนาแน่นของหมู่แอมิโนได้ประมาณ 8.07 x 10⁻⁸ 6.51 x 10⁻⁸ และ 5.13 x 10⁻⁸ โมล/ตารางเซนติเมตร สำหรับการตรึงด้วยอาร์จีดี อาร์จีดีเอส และจีอาร์จีดีเอส ตามลำดับ และจากการวิเคราะห์พื้นผิวของพอลิ(ดีทีอี-โค-20%ดีที)คาร์บอเนตที่ตรึงด้วยอาร์จีดีเพปไทด์หลังจากติดฉลากด้วยเฮปทาฟลูออโรบิวทิริลคลอไรด์ด้วยเทคนิคเอ็กพีเอสพบว่าได้เปอร์เซ็นต์การแทนที่ของ อาร์จีดีเอส และจีดาร์จีดีเอส เป็น 75 และ 30 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ จากผลจาการศึกษาความเข้ากันได้กับเซลล์พบว่าจีอาร์จีดีเอสมีประสิทธิภาพสูงสุดในการเพิ่มการยึดเกาะและการแบ่งตัวของเซลล์ไฟโบรบลาสต์ (บี95) เมื่อเปรียบเทียบกับพอลิสไตรีนที่ใช้เลี้ยงเซลล์ (ทีซพีเอส) ค่าสัดส่วนการยึดเกาะและการแบ่งตัวของเซลล์เพิ่มขึ้นจาก 92 และ 100 เปอร์เซ็นต์ เป็น 117 และ 129 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ หลังการตรึงด้วยจีอาร์จีดีเอส จากผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าหมู่ไกลซีนที่เพิ่มขึ้นมาทำให้เพปไทด์มีอิสระในการเคลื่อนที่ส่งผลให้ส่วนที่เป็นลำดับอาร์จีดีสามารถแสดงการตอบสนองต่อเซลล์อย่างจำเพาะเจาะจงได้อย่างมีประสิทธิภาพ |
|
dc.format.extent |
4151424 bytes |
|
dc.format.extent |
882414 bytes |
|
dc.format.extent |
10346098 bytes |
|
dc.format.extent |
2423620 bytes |
|
dc.format.extent |
5419318 bytes |
|
dc.format.extent |
731168 bytes |
|
dc.format.extent |
3767565 bytes |
|
dc.format.mimetype |
application/pdf |
|
dc.format.mimetype |
application/pdf |
|
dc.format.mimetype |
application/pdf |
|
dc.format.mimetype |
application/pdf |
|
dc.format.mimetype |
application/pdf |
|
dc.format.mimetype |
application/pdf |
|
dc.format.mimetype |
application/pdf |
|
dc.language.iso |
en |
es |
dc.rights |
Chulalongkorn University |
en |
dc.title |
Immobilization of RGD peptide on the surface of tyrosine-containing polycarbonates |
en |
dc.title.alternative |
การตรึงอาร์จีดีเพปไทด์บนพื้นผิวของพอลิคาร์บอเนตที่มีไทโรซีน |
en |
dc.type |
Thesis |
es |
dc.degree.name |
Master of Science |
es |
dc.degree.level |
Master's Degree |
es |
dc.degree.discipline |
Petrochemistry and Polymer Science |
es |
dc.degree.grantor |
Chulalongkorn University |
en |