Abstract:
การศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์ที่จะศึกษาผลของสารอะซีแมนแนนที่ต่อการแสดงออกของระดับอาร์เอ็นเอนำรหัสของเด็นทีนไซเอโลฟอสโฟโปรตีน ในเซลล์เนื้อเยื่อใน ผ่านระดับวิถีส่งสัญญาณไมโทเจน-แอคทิเวเตดโปรตีนไคเนส โดยเซลล์เนื้อเยื่อในจะถูกทดสอบด้วยสารอะซีแมนแนน จากนั้นทำการตรวจวัดระดับอาร์เอ็นเอนำรหัสของยีนเด็นทีนไซเอโลฟอสโฟโปรตีนด้วยวิธีอาร์ทีพีซีอาร์ และกระบวนการส่งสัญญานผ่านวิถีไมโทเจน-แอคติเวทเตดจะทำการใส่และไม่ใส่สารยับยั้งเฉพาะได้แก่ U0126 (ERK inhibitor) SP600125 (JNK inhibitor) และSB203580 (p38MAPK inhibitor) โดยจะทำการตรวจวัดโปรตีนด้วยวิธีเวสเทินบอต จากการศึกษาพบว่าสารอะซีแมนแนนที่ความเข้มข้น 4 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร มีผลต่อการเพิ่มระดับอาร์เอ็นเอนำรหัสของเด็นทีนไซเอโลฟอสโฟโปรตีน ได้อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (p<0.05) สารอะซีแมนแนนสามารถกระตุ้นให้เกิดการเติมกลุ่มฟอสเฟตสูงสุดของ ERK1/2 JNK และ p38 MAPK ในช่วง 45 15 และ15 นาที โดยเพิ่มขึ้นเป็น1.64±0.6 2.75±0.16 และ 3.11±0.09 เท่าเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม ตามลำดับ การใส่สารยับยั้งเฉพาะ ได้แก่ U0126, SP600125 และ SB203580 ก่อนทดสอบด้วยสารอะซีแมนแนน มีผลยับยั้งการเหนี่ยวนำการเติมกลุ่มฟอสเฟตของโปรตีนผ่านทาง ERK1/2, JNK และp38 MAPK ที่ระดับ 86 46 และ 51 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ จากการศึกษาสามารถสรุปได้ว่าสารอะซีแมนแนนกระตุ้นการแสดงออกของยีนเด็นทีนไซเอโลฟอสโฟโปรตีน และเกี่ยวข้องกับวิถีไมโทเจน-แอคทิเวเตดโปรตีนไคเนส