การประเมินประสิทธิภาพอนุภาคนาโนจากพอลิเมอร์ประจุบวกในการนำส่งยีนสู่เซลล์ประสาทเพาะเลี้ยง

เกวลิน คลังทอง

dc.contributor.advisor	เทวิน เทนคำเนาว์
dc.contributor.advisor	ณัฎฐิกา แสงกฤช
dc.contributor.author	เกวลิน คลังทอง
dc.contributor.other	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. คณะสหเวชศาสตร์
dc.date.accessioned	2013-03-14T11:13:54Z
dc.date.available	2013-03-14T11:13:54Z
dc.date.issued	2555
dc.identifier.uri	http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/29778
dc.description	วิทยานิพนธ์ (วท.ม.)--จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย, 2555	en
dc.description.abstract	ประเมินประสิทธิภาพของอนุภาคแม่เหล็กนาโน poly(methyl methacrylate) (PMMA) core/polyethyleneimine (PEI) shell nanoparticles (mag-PEI NP) เพื่อนำมาใช้เป็นตัวพาสำหรับการนำส่งยีนสู่เซลล์ประสาทเพาะเลี้ยง LAN-5 อนุภาค mag-PEI NP สังเคราะห์ด้วยวิธี one-step emulsifier-free emulsion polymerization โดยมีอนุภาคแม่เหล็กกระจายอยู่ในตัวพาร่วมกับหมู่เอมีนจากพอลิเมอร์ประจุบวก จากนั้นตรวจสอบคุณลักษณะทางเคมีกายภาพของตัวพาด้วยการวัดขนาดและหาค่าประจุของmag-PEI NP รวมทั้งทดสอบความสามารถในการจับดีเอ็นเอด้วย DNA binding assay และตรวจสอบรูปร่างลักษณะพื้นผิวโครงสร้างระดับอะตอมด้วย atomic force microscopy การประเมินประสิทธิภาพการนำส่งยีนของ mag-PEI NP ได้ทดสอบการนำส่งที่ช่วงเวลาต่างๆ เปรียบเทียบระหว่างการเหนี่ยวนำการนำส่งยีนด้วยแรงแม่เหล็กและปราศจากแรงแม่เหล็ก อีกทั้งได้ยืนยันการเคลื่อนที่เข้าสู่เซลล์ของ ตัวพาด้วย confocal laser scanning microscopy สภาวะที่ดีที่สุดได้ถูกนำมาใช้นำส่งยีนบำบัด tryptophan hydroxylase-2 (TPH-2) เข้าสู่เซลล์ LAN-5 และตรวจสอบการแสดงออกของยีนด้วยเทคนิค reverse-transcriptase polymerase chain reaction นอกจากนี้ ในงานวิจัยยังได้ศึกษาการเสริมประสิทธิภาพของตัวพาที่พัฒนา โดยใช้ TAT peptide ร่วมในระบบนำส่งยีนเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการนำส่งยีนให้ดียิ่งขึ้น	en
dc.description.abstractalternative	In this study, we evaluated the potential of magnetic poly(methyl methacrylate) (PMMA) core/polyethyleneimine (PEI) shell nanoparticles (mag-PEI NP) as the carrier for gene delivery into neurobalstoma cells (LAN-5). The mag-PEI nanoparticles were prepared by one-step emulsifier-free emulsion polymerization, generating highly loaded and monodispersed magnetic polymeric nanoparticles bearing an amine group. The physicochemical properties of the mag-PEI nanoparticles and DNA-bound mag-PEI nanoparticles were investigated using the DNA binding assay, atomic force microscopy and ζ-size measurements. The gene transfection efficiencies of mag-PEI nanoparticles were evaluated at different transfection times to compare between magnetic induction and non-induction. Confocal laser scanning microscopy confirmed intracellular uptake of the magnetoplex. The optimal conditions for transfection of TPH-2 were selected for therapeutic gene transfection. Finally, the mag-PEI nanoparticle magnetoplex was delivered into LAN-5 cells. Reverse-transcriptase polymerase chain reaction was performed to evaluate TPH-2 expression in a quantitative manner. Moreover, we also demonstrated the use of TAT peptide incorporated in our system was significantly enhanced gene transfection efficiency.	en
dc.format.extent	3487734 bytes
dc.format.mimetype	application/pdf
dc.language.iso	th	es
dc.publisher	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย	en
dc.relation.uri	http://doi.org/10.14457/CU.the.2012.1402
dc.rights	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย	en
dc.subject	ยีนบำบัด	en
dc.subject	ระบบประสาท -- โรค	en
dc.subject	ระบบประสาทส่วนกลาง	en
dc.subject	อนุภาคนาโน	en
dc.subject	Gene therapy	en
dc.subject	Nervous system -- Diseases	en
dc.subject	Central nervous system	en
dc.subject	Nanoparticles	en
dc.title	การประเมินประสิทธิภาพอนุภาคนาโนจากพอลิเมอร์ประจุบวกในการนำส่งยีนสู่เซลล์ประสาทเพาะเลี้ยง	en
dc.title.alternative	Efficiency evaluation of cationic polymer-based nanoparticles for gene delivery into cultured neuronal cells	en
dc.type	Thesis	es
dc.degree.name	วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต	es
dc.degree.level	ปริญญาโท	es
dc.degree.discipline	ชีวเคมีคลินิกและอณูทางการแพทย์	es
dc.degree.grantor	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย	en
dc.email.advisor	tewin.t@chula.ac.th
dc.email.advisor	ไม่มีข้อมูล
dc.identifier.DOI	10.14457/CU.the.2012.1402