Abstract:
วัตถุประสงค์ การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาผลของโคบอลต์คลอไรด์ต่อการแบ่งตัวของเซลล์ การแสดงออกของยีนที่แสดงความเป็นเซลล์ต้นกำเนิด และการแปรสภาพไปเป็นเซลล์สร้างเนื้อเยื่อแข็งของเซลล์เนื้อเยื่อในฟันแท้ของมนุษย์ วัสดุและวิธีการ นำเซลล์จากเนื้อเยื่อในฟันแท้มนุษย์มาเพาะเลี้ยงในห้องปฏิบัติการโดยการเติมสารละลายโคบอลต์คลอไรด์ที่ความเข้มข้น 25 และ 50 ไมโครโมลาร์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ ทำการศึกษาการเพิ่มจำนวนของเซลล์ด้วยเทคนิคเอ็มทีที ที่ระยะเวลา 1 วัน 3 วันและ 6 วัน การวิเคราะห์จำนวนเซลล์ที่มีการแสดงออกของโปรตีนสโตร-1 ด้วยเทคนิคโฟลวไซโตเมทรี ทำการศึกษาการแสดงออกของยีนที่แสดงความเป็นเซลล์ต้นกำเนิดได้แก่ เร็กซ์-1 อ็อกท์-4 นาน็อก และซ็อกซ์-2 โดยการวัดระดับการแสดงออกของอาร์เอ็นเอนำรหัสใช้วิธีรีเวอร์ส ทรานสคิปชั่น โพลิเมอร์เลสเชน รีแอคชั่น (อาร์ที-พีซีอาร์) และทำศึกษาการแปรสภาพไปเป็นเซลล์สร้างเนื้อเยื่อแข็งโดยการวัดค่าการทำงานของเอนไซม์อัลคาไลน์ฟอสฟาเตส และการหาปริมาณตะกอนแคลเซียมด้วยสีอลิซารินเรด เอส ทำการวิเคราะห์ข้อมูลด้วยสถิติวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว และวิธีทดสอบทีชนิดตัวอย่างอิสระ (p<0.05) ผลการศึกษา พบว่าเซลล์จากเนื้อเยื่อในฟันแท้ของมนุษย์ที่เพาะเลี้ยงด้วยอาหารเลี้ยงเซลล์ที่มีโคบอลต์คลอไรด์สามารถเพิ่มสัดส่วนการแสดงออกของโปรตีนสโตร-1 และการแสดงออกของยีนที่แสดงความเป็นเซลล์ต้นกำเนิด ยับยั้งการแปรสภาพเซลล์ไปเป็นเซลล์สร้างเนื้อเยื่อแข็งได้ดีกว่าการเพาะเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเซลล์เพียงอย่างเดียว โดยพบว่าในความเข้มข้น 50 ไมโครโมลาร์แสดงผลชัดเจนกว่าความเข้มข้น 25 ไมโครโมลาร์ สรุป จากผลการศึกษาที่พบอาจสรุปได้ว่าโคบอลต์คลอไรด์ส่งเสริมความเป็นเซลล์ต้นกำเนิดของเซลล์จากเนื้อเยื่อในฟันแท้ของมนุษย์ได้ โดยการเติมสารละลายโคบอลต์คลอไรด์ที่ความเข้มข้น 50 ไมโครโมลาร์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ น่าจะเป็นสภาวะที่เหมาะสมต่อการเลี้ยงเซลล์ต้นกำเนิดในห้องปฎิบัติการ
