การผลิตชุดตรวจคัดกรองโรคพราเดอร์-วิลลี่โดยอนุภาคทองคำนาโนเมตร

Abstract

วัตถุประสงค์ของการศึกษาวิจัยในครั้งนี้ มุ่งศึกษาและสร้างชุดตรวจวินิจฉัยโรคพราเดอร์-วิลลี่ โดยอาศัยคุณสมบัติเชิงแสงของอนุภาคทองคำระดับนาโนเมตรและความสามารถในการแยกสารของโครมาโทกราฟฟี ซึ่งสามารถวิเคราะห์ผลด้วยตาเปล่าได้โดยไม่ต้องอาศัยเครื่องมือจำเพาะ ในการศึกษานี้ จะทำการสังเคราะห์อนุภาคทองคำระดับนาโนเมตร แล้วตรวจสอบเอกลักษณ์ด้วยเครื่อง UV-visible spectrometry และ Transmission Electron Microscope (TEM) จากนั้น ติด Thiol-DNA porbe ลงบน AuNPs และเตรียม Streptavidin-biotin DNA probe ประกอบชุด Lateral flow strip test แล้วทำการทดสอบชุดตรวจ โดยใช้ DNA target จาก synthetic DNA ของยีน SNRPN และ DNA ของ ผู้ป่วยโรคพราเดอร์-วิลลี่ ผลการศึกษา พบว่า ในสภาวะที่เหมาะสม lateral flow strip test สามารถวิเคราะห์ปริมาณต่ำสุดของ Synthetic target แบบ Methylation และ Unmethylation ที่ 0.6 fmol และ 8 fmol ตามลำดับ สามารถตรวจพบ Methylation และ Unmethylation target ได้อย่างจำเพาะ และสามารถตรวจวิเคราะห์ DNA ของคนไข้ โรคพราเดอร์-วิลลี่ ได้ ชุดตรวจวินิจฉัยโรคพราเดอร์-วิลลี่สามารถแยกความแตกต่างระหว่าง methylation และ unmethylation ของ Synthetic DNA target และ MSP product การศึกษานี้ ทำให้ได้ต้นแบบสำหรับตรวจ Epigenetic change และนำไปสู่การประยุกต์ใช้