Abstract:
22-ไฮดรอกซีทิงจีโนน สารสอัดจากแฮนคอคำใหญ่มีผลสำคัญต่อการหายใจไมโตคอนเดรียที่แยกจากตับหนูขาว จะแสดงฤทธิ์อันคัปปลิงช่วงแรกและต่อมาจะยับยั้งการหายใจของไมโตคอนเดรีย เมื่อใช้สับสเตรทชนิด NAD+-linked (glutamate + malate) และ succinate การออกฤทธิ์คล้าย classical uncoupler คือ DNP กล่าวคือ ทำให้เกิดการไม่ควบดู่อันของการออกซิไดซ์สับสเตรทและ การสังเคราะห์ ATP ทาให้ไมโตคอนเดรียเสียการควบคุมการหายใจ ลดอัตราส่วน ADP/O และ RCI แก้ไขฤทธิ์ของ oligomycin ในการยับยั้ง state 3 respiration และกระตุ้น ATPase ของไมโตคอนเดรียถูกยับยั้งได้โดย oligomycin อย่างไรก็ตาม 22-ไฮดรอกซีทิงจิโนนให้ผลที่แตกต่างจาก DNP โดยฤทธิ์อันคิปปลิงของสารจะไม่เปลี่ยนแปลง เมื่อมีการ เปลี่ยนแปลง pH ของ incubation medium ในช่วง 7.2-7.6 และฤทธิ์ในการกระตุ้น ATPase ของไมโตคอนเดรียไม่ถูกยับยั้งโดย atractyloside ส่วนฤทธิ์ต่อการหายใจที่เกิดหลังจากฤทธิ์อันคัปปลิงนั้น พบว่า 22-ไฮดรอกซีทิงจีโนนจะออกฤทธิ์ยับยั้งการหายใจทั้ง state 3 state 4 เมื่อให้ NAD+-linked หรือ succinate เป็น อับสเตรท และยับยั้งการหายใจ state 3u เฉพาะเมื่อใช้สับสเตรทชนิด NAD+-linked แต่ไม่มีผลยับยั้งการหายใจเมื่อใช้ ascorbate + TMPD เป็นสับสเตรท แสดงว่า 22-ไฮดรอกซีทิงจีโนน ออกฤทธิ์ ยับยั้งการหายใจที่ complex I ของลูกโซ่การทายใจมากกว่า complex II 22-ไฮดรอกซีทิงจีโนนไม่มีผลต่อ monoamine oxidase activity bovine serum albumin และ DTNB สามารถลดฤทธิ์อันคัปปลิงและฤทธิ์ยับยั้งการหายใจของสาร ส่วน DTT สามารถป้องอันฤทธิ์อันคัปปลิงและฤทธิ์ยับยั้งการหายใจของ 22-ไฮดรอกซีทิงจีโนนได้อย่างสมบูรณ์ ดังนั้นกลไกการเกิดอันคัปปลิงและการยับยั้งการหายใจของไมโตคอนเดรียในระดับโมเลกุลส่วนหนึ่งจะ เกี่ยวข้องกับการออกฤทธิ์ที่ sulfhydryl groups ที่ผนังชั้นในของไมโตคอนเดรีย ทำให้ไมโตคอนเดรียออกซิไดซ์ NADH จากภายนอกได้
