Please use this identifier to cite or link to this item:
https://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/10462
| Title: | ผลของสารพวกซัลโฟนาไมด์ต่อไดไฮโดรพเทอโรเอท ซินเทส จาก Escherichia coli |
| Other Titles: | Effect of sulfonamides on dihydropteroate synthase from Escherichia coli |
| Authors: | นภาพร สายอุบล |
| Advisors: | วิชัย สุทธิมูล |
| Other author: | จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. บัณฑิตวิทยาลัย |
| Advisor's Email: | ไม่มีข้อมูล |
| Subjects: | แบคทีเรีย ซัลโฟนาไมด์ ไดไฮโดรพเทอโรเอทซินทาส |
| Issue Date: | 2526 |
| Publisher: | จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย |
| Abstract: | งานวิจัยนี้ได้ศึกษาผลการยับยั้งของสารพวกซัลโฟนาไมด์ 5 ชนิด ต่อการทำงานของไดไฮโดรพเทอโรเอท ซินเทส จาก Escherichia coli โดยการหาค่าของความเข้มข้นที่น้อยที่สุดที่ใช้ในการยับยั้งการเจริญเติบโตของแบคทีเรีย (MIC) ค่าของความเข้มข้นของซัลโฟนาไมด์ที่ใช้ในการยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ได้ 50 เปอร์เซนต์ (I50) และค่าคงที่ของการยับยั้ง (Ki) พบว่าค่าของ MIC ของ sulfanilamide ในอาหารเลี้ยงเชื้อแอลบี-บรอท เท่ากับ 4.30x10-2 โมล/ลิตร และในอาหารเลี้ยงเชื้อสูตรปรับต่ำกลูโคสค่า MIC ของ sulfanilamide และ p-aminobenzenesulfonamido-propyl bromide เท่ากับ 1.31x10-3 โมล/ลิตร และ 2.91x10-3 โมล/ลิตร ตามลำดับ จากการศึกษาค่า I50 ของซัลโฟนาไมด์ที่มีต่อ enzyme ที่ได้จากการตกตะกอนด้วยแอมโมเนียมซัลเฟตอิ่มตัว 20-60% พบว่าค่า I50 ของ sulfanilamide, N,N'-bis(sulfanilyl)-L-cystine, p-aminobenzenesulfonamidopropyl thiosulfate และ 4-(4-aminobenzenesulfonamido) benzenesulfonamidoglycine เท่ากับ 2.15x10-3, 3.23x10-3, 3.35x10-3 และ 2.70x10-5 โมล/ลิตร ตามลำดับ หลังจากทำเอนไซม์ให้บริสุทธิ์ขึ้นโดยวิธีแอฟฟินิตีโครมาโตรกราฟฟิ ปรากฏว่าได้ความบริสุทธิ์เพิ่มขึ้น 209 เท่า แต่อย่างไรก็ตามจากการทำอะไครลาไมด์เจลอิเลคโตรโรีซิสแบบแท่งพบว่า มีแถบของโปรตีน 7 แถบ อุณหภูมิที่เหมาะสมของการทำงานของเอนไซม์เท่ากับ 45-46 องศาเซลเซียส pH ที่เหมาะสมเท่ากับ 8.58 ค่า Km ของกรดพารา-อะมิโนเบนโซอิกเท่ากับ 2.86x10-5 โมล/ลิตร และค่า Ki ของ sulfanilamide, p-aminobenzenesulfonamidopropyl bromide, N,N'-bis(sulfanilyl)-L-cystine, p-aminobenzenesulfonamidopropyl thiosulfate และ 4-(4-aminobenzenesulfonamido) benzenesulfonamidoglycine เท่ากับ 4.30x10-4, 7.50x10-4, 3.50x10-4, 5.38x10-4 และ 7.50x10-6 โมล/ลิตร ตามลำดับ พบว่าการยับยั้งของสารพวกซัลโฟนาไมด์ทั้ง 5 ชนิด เป็นแบบแข่งขันกับกรดพารา-อะมิโนเบนโซอิก |
| Other Abstract: | Five sulfonamides were selected to study for their inhibitory activity against dihydropteroate synthase from Escherichia coli by measuring the minimum inhibitory concentration (MIC), the concentration required for 50% inhibition (I50) and the inhibitor constant (Ki). The MIC value for sulfanilamide was 4.30 x 10-2 mol/l when the LB broth was used as a nutrient medium. The MIC values for sulfanilamide and p-aminobenzenesulfonamidopropyl bromide were 1.31 x 10-3 mol/l and 2.91 x 10-3 mol/l, respectively, when the glucose minimum medium was used as a nutrient medium. The enzyme precipitated with 20-60% saturated ammonium sulfate was used for the determination of I50 and the I50 values for sulfanilamide, N,N'-bis(sulfanilyl)-L-cystine, p-aminobenzenesulfonamidopropyl thiosulfate and 4-(4-aminobenzenesulfonamido) benzenesulfonamido-glycine were found to be 2.15 x 10-3, 3.23 x 10-3, 3.35 x 10-3 and 2.70 x 10-5 mol/l, respectively. The purity of the enzyme was increased 209-fold after the affinity chromatography step, however, the enzyme showed seven bands of proteins by acrylamide gel electro-phoresis. The optimal pH and temperature of the enzyme were 8.58 and 45-46 C, respectively. The Km value for p-aminobenzoic acid was 2.86 x 10-5 mol/l. The Ki values for sulfanilamide, p-aminobenzenesulfonamidopropyl bromide, N,N'-bis(sulfanilyl)-L-cystine, p-aminobenzenesulfonamidopropyl thiosulfate and 4-(4-aminobenzenesulfonamido) benzenesulfonamidoglycine were 4.30 x 10-4, 7.50 x 10-4, 3.50 x 10-4, 5.38 x 10-4 and 7.50 x 10-6 mol/l, respectively. All five sulfonamides were competitive inhibitors with p-aminobenzoic acid. |
| Description: | วิทยานิพนธ์ (วท.ม.)--จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย, 2526 |
| Degree Name: | วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต |
| Degree Level: | ปริญญาโท |
| Degree Discipline: | ชีวเคมี |
| URI: | http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/10462 |
| ISBN: | 9745626872 |
| Type: | Thesis |
| Appears in Collections: | Grad - Theses |
Files in This Item:
| File | Description | Size | Format | |
|---|---|---|---|---|
| Napaporn_s.pdf | 15.17 MB | Adobe PDF | View/Open |
Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.