การโคลนยีนเอทีพีซัลฟูรีเลสของแบคทีเรียที่สามารถออกซิไดซ์กำมะถัน ซึ่งแยกได้จากแหล่งธรรมชาติในประเทศไทย

Abstract

ได้ทำการโคลนยีนที่เป็นรหัสของเอนไซม์เอทีพีซัลฟูรีเลสจาก แบคทีเรียสายพันธุ์ G02 ซึ่งเป็นแบคทีเรียที่มีประสิทธิภาพสูงในการออกซิไดซ์กำมะถันไพไรต์ไปเป็นกำมะถันซัลเฟต แยกได้จากดินในประเทศไทยสังเคราะห์ดีเอ็นเอติดตาม โดยวิธี polymerase chain reaction ใช้โครโมโซมอลดีเอ็นเอของแบคทีเรียสายพันธุ์ G02 เป็นแม่แบบใช้สายโอลิโกนิวคลีโอไทด์ที่สังเคราะห์ขึ้นจากการทำนายลำดับเบสของบริเวณลำดับกรดอะมิโนของเอนไซม์เอทีพีซัลฟูรีเลสของแบคทีเรียที่อาศัยแบบภาวะที่ต้องพึ่งพา อยู่กับ Riftia pachyptila และของ Saccharomyces cerevisiae ที่มีความคล้ายคลึงกันสูงเป็นดีเอ็นเอตั้งต้นได้โคโลนีทรานฟอร์แมนท์ที่มียีนที่เป็นรหัสของเอนไซม์เอทีพีซัลฟูรีเลส โดยการใช้ดีเอ็นเอติดตามตรวจหายีนที่เป็นรหัสของเอนไซม์เอทีพีซัลฟูรีเลสจากธนาคารยีนของแบคทีเรียสายพันธุ์ G02 โดยวิธี colony hybridization พิสูจน์ซ้ำโดยการสกัดเอาพลาสมิดลูกผสมมาทำ dot blot hybridization และตัดเอาชิ้น ดีเอ็นเอสอดแทรกจากพลาสมิดลูกผสมข้างต้นมาทำSouthern hybridization กับดีเอ็นเอติดตาม