ศึกษาแฮรี่รูทของลำโพงกาสลักที่เกิดจากการย้ายยีนจากอะโกรแบคทีเรียม ไรโซจีเนส

Abstract

Hairy root ถูกชักนำให้เกิดบนลำต้นและขึ้นใบของต้นกล้าลำโพงกาสลัก (Datura metel Linn.) ที่เพาะในสภาพปลอดเชื้อโดย Agrobacterium rhizogenes สายพันธุ์ A4 8196 R1000 และ 15834 การชักนำได้ผลดีบนขึ้นใบโดยสายพันธุ์ R1000 A4 และ 8196 เมื่อแยก hairy root มาเลี้ยงในอาหารสูตรต่างๆ ซึ่งไม่ใส่ฮอร์โมน พบว่า hairy root สามารถเจริญให้สาขาจำนวนมาก และรวดเร็วกว่าในรากปกติ เมื่อศึกษาค่า growth index ของน้ำหนักสดของ hairy root พบว่าการเจริญในอาหารสูตรดัดแปลง B5 ดีกว่าสูตรดัดแปลง MS ประมาณ 2 เท่า และยังพบ transformed plant เจริญจาก hairy root ได้บ้าง ซึ่ง transformed plant ที่ได้ลักษณะข้อสั้น ใบเป็นคลื่น และเจริญช้ามาก การตรวจหา atropine ใน hairy root ของลำโพงกาสลักทำโดยวีธี TLC ส่วนการวิเคราะห์หาปริมาณทำโดยวิธี HPLC ซึ่งพบว่าปริมาณ atropine ใน hairy root 3 line ที่เกิดจาก A. rhizogenes สายพันธุ์ A4 มีปริมาณต่างกัน โดยมีปริมาณสูงสุด 0.49 % DW และ hairy root 3 line ที่เกิดจากพันธุ์ R1000 มีปริมาณต่างกันเช่นกัน โดยมีปริมาณสูงสุด 0.56 % DW เมื่อเปรียบเทียบปริมาณ atropine ใน hairy root กับรากปกติพบว่า hairy root มีปริมาณ atropine สูงกว่าในรากปกติโดยเฉลี่ยประมาณ 2 เท่า และพบว่า hairy root ที่เจริญในทีมืดมีปริมาณ atropine สูงกว่า hairy root ที่เจริญในที่สว่าง