การเสริมการผลิตสารลดแรงตึงผิวชีวภาพใน Pichia anomala PY1 โดยการกลายพันธุ์

Abstract

เมื่อทำการกลายพันธุ์ Pichia anomala PY1 ด้วยรังสีอัลตราไวโอเลตร่วมกับสาร Ethylmethane sulfonate คัดเลือกได้ยีสต์สายพันธุ์กลาย MUE24 เมื่อทำการเพาะเลี้ยงในอาหารที่มีน้ำมันถั่วหลือง 4 % เป็นแหล่งคาร์บอน โดยให้ค่าการกระจายน้ำมันเท่ากับ 17.64 ตารางเซนติเมตร ซึ่งมีค่ามากกว่าประมาณ 3 เท่า เมื่อเทียบกับสายพันธุ์ PY 1 และค่าแรงตึงผิวต่ำสุดเท่ากับ 35 mN/m ในอาหารเลี้ยงเชื้อชนิดเดียวกัน และเมื่อทำการหาสภาวะที่เหมาะสมในการผลิตสารลดแรงตึงผิวชีวภาพของสายพันธุ์กลาย MUE24 พบว่าสามารถผลิตสารลดแรงตึงผิวชีวภาพที่มีประสิทธิภาพสูงสุดในอาหารเหลวปรับปรุงสูตรที่ประกอบด้วย KH₂PO₄ 0.02 % MgSO₄.7H₂O 0.02 % สารสกัดยีสต์ 0.65 % NaNO₃ 0.11 % น้ำมันถั่วเหลือง 13.34 % และกลูโคส 6.66 % (อัตราส่วน 2:1) ควบคุมค่าความเป็นกรดด่างเริ่มต้นเท่ากับ 4.5 โดยมีภาวะการเลี้ยงเชื้อที่อุณหภูมิ 30 °C ในระดับขวดเขย่าอัตราเร็ว 200 รอบต่อนาที เป็นเวลา 7 วัน สารลดแรงตึงผิวชีวภาพที่ผลิตได้มีค่าแรงตึงผิวต่ำสุด 37.25 mN/m ค่าการกระจายน้ำมันเท่ากับ 53.87 ตารางเซนติเมตร และให้ผลผลิตเท่ากับ 0.50 กรัมต่อลิตร จากการวิเคราะห์สารลดแรงตึงผิวชีวภาพที่ผลิตได้จากยีสต์สายพันธุ์กลาย MUE 24 ด้วยวิธีโครมาโตกราฟีแบบ Analytical Thin-Layer Chromatography พบว่ามีส่วนประกอบ 4 ส่วน ที่มีค่าคงที่ของอัตราส่วนการเคลื่อนที่ (Rf ) เท่ากับ 0.96, 0.89, 0.84 และ 0.69 (Fa-Fd) ตามลำดับ ซึ่งต่างจากของยีสต์ Pichia anomala PY1 โดย Fb ของยีสต์สายพันธุ์กลาย MUE 24 ให้ค่าการกระจายน้ำมันสูงสุด และการศึกษาความสามารถในการก่ออิมัลชันของสารลดแรงตึงผิวชีวภาพที่ผลิตได้โดยการวัดค่าความเสถียรในการก่ออิมัลชัน (Emulsification stability) และค่าดัชนีการเกิดอิมัลชัน (Emulsion Index) ต่อน้ำมัน 2 ชนิดได้แก่ น้ำมันคาโนลา และน้ำมันถั่วเหลือง ที่ 24 ชั่วโมง ซึ่งยีสต์สายพันธุ์กลาย MUE 24 ให้ค่าค่าดัชนีการเกิดอิมัลชันเท่ากับ 94.14 และ 88.53 เปอร์เซ็นต์ตามลำดับ