Please use this identifier to cite or link to this item:
https://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/71798
| Title: | การเพิ่มประสิทธิภาพการผลิตจิบเบอเรลลินของ Gibberella fujikuroi N9-34 โดยการกลายพันธุ์ |
| Other Titles: | Improvement of gibberellin production by Gibberella fujikuroi N9-34 through mutation |
| Authors: | อุษามาส วังชัยสุนทร |
| Advisors: | นลิน นิลอุบล ไพเราะ ปิ่นพานิชการ |
| Other author: | จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. บัณฑิตวิทยาลัย |
| Subjects: | กรดจิบเบอเรลลิก การเพาะเลี้ยง Gibberellic acid Cultures (Biology) |
| Issue Date: | 2538 |
| Publisher: | จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย |
| Abstract: | งานวิจัยนี้เป็นการเพิ่มประสิทธิภาพการผลิตกรดจิบเบอเรลลิก (GA₃) ของ Gibberella fujikuroi (ซึ่งผลิต GA₃ ได้ 577 มิลลิกรัมต่อลิตร) โดยการกลายพันธุ์ด้วยแสง UV 1 รอบ และตามด้วย NTG 2 รอบ และเพิ่มอุณหภูมิสำหรับการเพาะเลี้ยง จากเดิม 25 องศาเซลเซียส เป็น 28 องศาเซลเซียส การคัดเลือกสายพันธุ์กลายพันธุ์ขั้นปฐมภูมิ ได้ตรวจสอบปริมาณ GA₃ ที่สายพันธุ์ต่าง ๆ ผลิตได้อย่างคร่าว ๆ โดยใช้วิธี TLC ตามด้วยวิธี HPTLC ด้วยวิธีดังกล่าวสามารถคัดสายพันธุ์ที่ผลิต GA₃ ต่ำกว่าสายพันธุ์ตั้งต้นออกเป็นจำนวนมาก สายพันธุ์ที่คัดเลือกไว้ในขั้นปฐมภูมิได้นำมาคัดเลือกขั้นทุติยภูมิ โดยการวิเคราะห์หาปริมาณ GA₃ ด้วย HPLC ซึ่งเป็นวิธีวิเคราะห์ที่แม่นยำ จากการคัดเลือกสายพันธุ์ที่ผลิต GA₃ สูงสุดในแต่ละขั้นตอน ได้สายพันธุ์ UV-28, UN-84 และ UNN-653 ซึ่งผลิต GA₃ ได้ 701, 909 และ 1257 มิลลิกรัมต่อลิตร ตามลำดับ ในวันที่ 7 ของการเพาะเลี้ยง และเมื่อเปลี่ยนแหล่งไนโตรเจนจากกากเมล็ดฝ้ายย่อยด้วยกรดกำมะถัน เป็นกากถั่วเหลืองที่สกัดน้ำมันออกแล้ว ได้ปริมาณ GA₃ 1095, 1051 และ 1396 มิลลิกรัมต่อลิตร ในวันที่ 7 ของการเพาะเลี้ยง จากการทดสอบประสิทธิภาพการผลิต GA₃ ในถังหมักขนาด 5 ลิตร ของสายพันธุ์ UNN-65₃ พบว่าผลิต GA₃ ได้ 1310 มิลลิกรัมต่อลิตร ในวันที่ 7 ของการเพาะเลี้ยง นอกจากนี้ในงานวิจัยยังพบว่า การกลายพันธุ์ด้วย NTG จะได้สายพันธุ์ที่เสถียรกว่าการกลายพันธุ์ด้วยแสง UV |
| Other Abstract: | GA₃ producing ability of Gibberella fujikuroi N9-34, a strain capable to produce GA₃ of 577 mg/l, was increased by mutating this organism with UV in the first step and following by 2 consecutive steps with NTG. The cultivation temperature for GA₃ production was also increased from 25 ℃ to 28 ℃. Primary screening for ability to produce GA₃ of the mutants was by TLC following by HPTLC. Using these techniques, several strains with low GA₃ producing ability were eliminated. The selected strains were further secondary screened for GA₃ producing by HPLC, an accurate method for GA₃ determination. Mutant strains namely UV-28, UN-84 and UNN-653 capable to produce GA₃ of 701, 909 and 1257 mg/l, respectively, on day 7 were selected from each mutation step. When cottoned hull hydrolysate was replaced by defatted soybean meal as a N-source in a culture medium, GA3 production by these strains on day 7 were 1095, 1051 and 1396 mg/l, respectively. Cultivation of UNN-653 in a 5-1 fermenter yielded 1310 mg of GA₃/l on 7 day. The present work also observed that mutants from NTG treatment were more stable than that from UV treatment. |
| Description: | วิทยานิพนธ์ (วท.ม.)--จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย, 2538 |
| Degree Name: | วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต |
| Degree Level: | ปริญญาโท |
| Degree Discipline: | เทคโนโลยีชีวภาพ |
| URI: | http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/71798 |
| ISBN: | 9746322281 |
| Type: | Thesis |
| Appears in Collections: | Grad - Theses |
Files in This Item:
| File | Description | Size | Format | |
|---|---|---|---|---|
| Usamas_wa_front.pdf | หน้าปก สารบัญ และบทคัดย่อ | 16.49 MB | Adobe PDF | View/Open |
| Usamas_wa_ch1.pdf | บทที่ 1 | 20.73 MB | Adobe PDF | View/Open |
| Usamas_wa_ch2.pdf | บทที่ 2 | 12.72 MB | Adobe PDF | View/Open |
| Usamas_wa_ch3.pdf | บทที่ 3 | 48.95 MB | Adobe PDF | View/Open |
| Usamas_wa_ch4.pdf | บทที่ 4 | 6.68 MB | Adobe PDF | View/Open |
| Usamas_wa_back.pdf | บรรณานุกรมและภาคผนวก | 21.25 MB | Adobe PDF | View/Open |
Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.