1. CUIR at Chulalongkorn University
  2. Faculty and Institute
  3. Faculty of Science - Sci
  4. Sci - Theses
Please use this identifier to cite or link to this item: https://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/68401
Full metadata record
DC FieldValueLanguage
dc.contributor.advisorอมร เพชรสม-
dc.contributor.advisorไพศาล สิทธิกรกุล-
dc.contributor.authorพูลศิริ พฤกษ์กานนท์-
dc.contributor.otherจุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. คณะวิทยาศาสตร์-
dc.date.accessioned2020-10-07T07:59:08Z-
dc.date.available2020-10-07T07:59:08Z-
dc.date.issued2542-
dc.identifier.isbn9743346791-
dc.identifier.urihttp://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/68401-
dc.descriptionวิทยานิพนธ์ (วท.ม.)--จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย, 2542-
dc.description.abstractการแยกสารเปปไทด์จากต่อมไซนัสของกุ้งกุลาดำ ทำโดยผ่าตัดต่อมไซนัสจากก้านตาของกุ้ง กุลาดำจำนวน 1,000 ตา นำมาบดละเอียดในสารละลายเมทานอล-กรดอะซิติก-น้ำ (90:1:9) หลังจากนำสารสกัดผ่าน C18 Sep-Pak cartridge นำไปทำให้บริสุทธิ์ต่อด้วย RP-HPLC 2-3 ขั้นตอน โดยใช้คอลัมน์ C18, C8 และ Cyano และระบบตัวทำละลาย 2 ระบบ คือ acetonitrile / trifluoroacetic acid และ acetonitrile / heptafluorobutyric acid การติดตามสารเปปไทดํในระหว่างการแยกบริสุทธิ์ใช้วิธีดูจากโครมาโตแกรมที่ความยาวคลื่น 215 นาโนเมตร และ Dot-ELISA โดยใช้แอนติบอดี 4 ชนิด ได้แก่ mouse anti-crustacean hyperglycemic hormone (CHH) antiserum, rabbit anti-human pancreatic polypeptide c-terminal hexapeptide (PP6) antiserum, rabbit anti β -pigment dispersing hormone (PDH) antiserum, mouse anti-FMRFamide monoclonal antibody (FM-23), mouse anti-KNEFIRFamide monoclonal antibody (AF1-62) และ mouse anti-KNEYLRFamide monoclonal antibody (AF2-32) จากแฟรคชั่น 29 แฟรคชั่น ของ RP-HPLC ในขั้นตอนที่ 1 สามารถทำให้เปปไทด์บริสุทธิ์ได้ 99 ตัวอย่าง ซึ่งจากการตรวจหาน้ำหนักโมเลกุลโดย MALDI-TOF MS พบว่ามีน้ำหนักโมเลกุลตั้งแต่ 932.6-9,103.1 ดาลตัน ตัวอย่างที่แยกได้เกือบทั้งหมดมีน้ำหนักโมเลกุลแตกต่าง จากสารเปปไทด์ที่รายงานในกุ้งกุลาดำ, กุ้งคุรุมา และ กุ้งก้ามกราม จึงคาดว่าสารเปปไทดบริสุทธิ์ที่ได้นี้ ส่วนใหญ่น่าจะมีลำดับกรดอะมิโนแตกต่างจากลำดับกรดอะมิโนของสารเปปไทด์ที่เคยรายงานมาก่อน-
dc.description.abstractalternativeIsolation of peptides from sinus glands of Penaeus monodon was performed by dissecting out of sinus glands from the 1,000 eyestalks before extracting in methanol-acetic acid-water (90:1:9). The extract was partially purified using C18 cartridge and was further purified by 2 to 3 steps of RPHPLC using 3 types of columns i.e. C18, C8 and Cyano and 2 solvent systems i.e. acetonitrile / trifluoroacetic acid, acetonitrile / heptafluorobutyric acid. The chromatograms were detected at the absorbance of 215 nm. During each step of purification, the peptides were assayed by Dot-ELISA against 4 antibodies specific to different peptides: mouse anti-crustacean hyperglycaemic hormone (CHH) antiserum, rabbit anti-human pancreatic polypeptide c-terminal hexapeptide (PP6) antiserum, rabbit anti p-pigment dispersing hormone (PDH) antiserum and combination of monoclonal antibodies made against FMRFamide (FM-23), KNEFIRFamide (AF1-62) and KNEYLRFamide (AF2- 32). Ninety-nine fractions of pure peptide were obtained from the twenty-nine fractions of the first step of HPLC. The molecular weight of the peptides determined by MALDI-TOF mass spectrometry were ranging from 932.6 to 9103.1 daltons. Most of the peptides were different from previous peptides reported in Penaeus monodon, Penaeus japonoicus and Macrobrachium rosenbergii. Therefore, almost all of the peptides obtained from this study are expected to be different sequences from those previously reported.-
dc.language.isoth-
dc.publisherจุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย-
dc.rightsจุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย-
dc.subjectกุ้งกุลาดำ-
dc.subjectต่อมไซนัส-
dc.subjectเปปไทด์ฮอร์โมน-
dc.titleการทำให้บริสุทธิ์และจำแนกชนิดเปปไทด์จากต่อมไซนัสของกุ้งกุลาดำ-
dc.title.alternativePurification and identification of peptides from sinus gland of Penaeus monodon-
dc.typeThesis-
dc.degree.nameวิทยาศาสตรมหาบัณฑิต-
dc.degree.levelปริญญาโท-
dc.degree.disciplineเทคโนโลยีชีวภาพ-
dc.degree.grantorจุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย-
Appears in Collections:Sci - Theses

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
Poolsiri_pr_front_p.pdf1.04 MBAdobe PDFView/Open
Poolsiri_pr_ch1_p.pdf742.62 kBAdobe PDFView/Open
Poolsiri_pr_ch2_p.pdf2.12 MBAdobe PDFView/Open
Poolsiri_pr_ch3_p.pdf888.57 kBAdobe PDFView/Open
Poolsiri_pr_ch4_p.pdf3.22 MBAdobe PDFView/Open
Poolsiri_pr_ch5_p.pdf1.03 MBAdobe PDFView/Open
Poolsiri_pr_back_p.pdf946.75 kBAdobe PDFView/Open
Show simple item record


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.