การเรโซลูชั่นของเมนทอลเรซิมิกด้วยเอนไซม์ไลเปสตรึงรูปบนเรซินแลกเปลี่ยนไอออน

Abstract

วัตถุประสงค์สูงสุดของโครงการวิจัยนี้แบ่งออกเป็น 3 ขั้นตอนคือ หนึ่ง ศึกษาปัจจัยที่เหมาะสมในการตรึงรูปเอนไซม์ไลเปสจาก Candida cylindracea บนเรซินแลกเปลี่ยนไอออน เพื่อใช้เป็นตัวเร่งในปฏิกิริยาทรานเอสเทอริฟิเคชั่นของเรซิมิกเมนทอลและเฮกซิลอะซิเตตเป็นปฏิกิริยาต้นแบบ สอง ศึกษาหาค่าตัวแปรทางจลนพลศาสตร์ของเอนไซม์ตรึงรูป และ สาม ศึกษาถึงผลกระทบของอัตราการไหลในการป้อนสับเสตรทเข้าสู่หอปฏิกรณ์แบบแพคเบด ดังนั้นการทดลองจึงถูกแบ่งออกเป็น 3 ขั้นตอนคือ หนึ่ง การหาสภาวะที่เหมาะสมสำหรับการตรึงเอนไซม์ พบว่าสภาวะที่เหมาะสมคือ เวลาที่ใช้ในการตรึงรูปเท่ากับ 5 ชั่วโมง ความเข้มข้นของเอนไซม์ ไลเปสเริ่มต้นในสารละลายบัฟเฟอร์เท่ากับ 15 กรัมต่อลิตร และค่าความเป็นกรด-ด่าง เท่ากับ 7.0 สอง การหาตัวแปรทางจลนพลศาสตร์ของเอนไซม์ตรึงรูป พบว่ากลไกการเกิดปฏิกิริยาเป็นกลไกแบบปิงปอง ไบ-ไบ ซึ่งสามารถคำนวณค่าตัวแปรทางจลนพลศาสตร์ได้คือ Vmax = 83.33 mumol.hr-1 g-enz-1, kA = 85.58 mM, kB = 480 mM ซึ่งสามารถเขียนเป็นสมการอัตราการเกิดปฏิกิริยาได้ดังนี้ V = 83.33 [A][B]/480[A]+85.58[B]+[A][B] และสาม การหาอัตราการไหลที่เหมาะสมในการป้อนสับเสตรทเข้าสู่หอปฏิกรณ์แบบแพคเบด และเสถียรภาพในการทำงานของเอนไซม์ตรึงรูป พบว่าอัตราการไหลเวียนที่เหมาะสมคือ 70 มิลลิลิตรต่อนาที และเอนไซม์ตรึงรูปมีเสถียรภาพที่ดีโดยสูญเสียอัตราการเกิดปฏิกิริยาจำเพาะเพียงร้อยละ 24 หลังจากเร่งปฏิกิริยาอย่างต่อเนื่องในหอปฏิกรณ์แบบแพคเบดเป็นเวลา 10 วัน โดยมีค่าครึ่งชีวิตเท่ากับ 25 วัน