Abstract:
การศึกษาอนุกรมวิธานแบคทีเรียชอบเค็มที่สามารถผลิตเอนไซม์โปรติเอสจากอาหารหมักชนิดต่าง ๆ ที่เก็บจากตลาด และจากน้ำปลาที่ผลิตในจังหวัดสมุทรปราการ สมุทรสงคราม ระยอง รวมทั้งจากบูดูในจังหวัดปัตตานี รวม 110 ตัวอย่าง พบว่าสามารถแยกแบคทีเรียชอบเค็มได้จำนวน 279 ไอโซเลต จากผลการคัดเลือกแบคทีเรียชอบเค็มที่สามารถผลิตเอนไซม์โปรติเอสขั้นต้น พบแบคทีเรียชอบเค็มปานกลาง 38 ไอโซเลต และแบคทีเรียชอบเค็มสูง 7 ไอโซเลต จากการศึกษาทางอนุกรมวิธานของแบคทีเรียตัวแทน 82 สายพันธุ์ โดยอาศัยลักษณะทางฟีโนไทป์ ลักษณะทางอนุกรมวิธานเคมี และ DNA-DNA similarity รวมทั้งการวิเคราะห์ลำดับเบสในช่วง 16S rDNA สามารถพิสูจน์เอกลักษณ์ของแบคทีเรียชอบเค็มปานกลางจำนวน 56 สายพันธุ์ ได้ 10 กลุ่ม โดยจัดเป็นแบคทีเรีย Lentibacillus salicampi 3 สายพันธุ์, L. juripiscarius sp. nov. 5, L. halophilus sp. nov. 15 สายพันธุ์, L. kapialis sp. nov. 2 สายพันธุ์ Filobacilius sp. 2 สายพันธุ์ Virgibacillus halodenitrficans 6 สายพันธุ์, Virgibacillus sp. 1 สายพันธุ์, Marinococcus 3 สายพันธุ์, Salinicoccus 15 สายพันธุ์ และ Chromohalobacter salexigens 4 สายพันธุ์, พบแบคทีเรียชอบเค็มสูงจำนวน 26 สายพันธุ์ ได้ 3 กลุ่ม ซึ่งพิสูจน์เอกลักษณ์ได้เป็น Halobacterium salinarum 10 สายพันธุ์, Halococcus saccharolyticus 1 สายพันธุ์ และ Halococcus sp. nov. 15 สายพันธุ์ ผลการศึกษาการผลิตเอนไซม์โปรทีเอสที่ปล่อยออกนอกเซลล์ พบว่าแบคทีเรียชอบเค็มสูง (extremely halophile) สายพันธุ์ DS2-5, KS87-2 และ DB10-1 ให้ค่า specific activity 0.2230-2.6524 U/mg protein ที่ 37 ํC และ 1.6452-5.4643 U/ mg protein ที่ 30 ํC โดยใช้ casein เป็นสับสเตรท และให้ค่า specific activities 0.7808-1.9927 U/ mg protein ที่ 37 ํC และ 0.3525-6.7468 U/ mg protein ที่ 30 ํC โดยใช้ fish powder เป็นสับสเตรท แบคทีเรียชอบเค็มปานกลาง (moderate halophile) สายพันธุ์ RF2-5, RBU1-1, SSK10-5, PN2-19, SSK2-2 และ SSK3-2 ให้ค่า specific activity สูง 11.1140-29.7991 U/ mg protein ที่ 37 ํC และให้ค่า specific activity สูง 23.8335-32.8760 U/ mg protein ที่ 30 ํC โดยใช้ casein เป็นสับสเตรท และพบว่าการใช้ fish powder เป็น substrate จะให้ค่า specific activity 12.7219-29.7991 U/ mg protein ที่ 37 ํC และ specific activity 13.9652-49.5517 U/ mg protein ที่ 30 ํC นอกจากนี้ได้เลือกตรวจสอบการผลิตเอนไซม์โปรทีเอสภายในเซลล์ของแบคทีเรียชอบปานกลางบางสายพันธุ์
