Abstract:
ออสทีโอพอนทินเป็นโปรตีนชนิดหนึ่งที่สามารถทำหน้าที่เป็นโมเลกุลให้สัญญาณ (Ssignaling
molecules) ในเทคนิควิศวกรรมเนื้อเยื่อ (tissue engineering) โดยมีบทบาทเกี่ยวกับการสร้างและ
เกิดใหม่ของเนื้อเยื่อกระดูก จากการศึกษาที่ผ่านมาพบว่าออสทีโอพอนทินที่ผลิตจากต้นยาสูบ
Nicotiana benthamiana สามารถกระตุ้นยีนส์ที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการ bone remodeling ได้
นอกจากนี้ยังมีการศึกษาการผลิตออสทีโอพอนทินโดยปรับปรุงชิ้นส่วนของยีนส์ให้เหลือเฉพาะส่วน
ของ C-terminal และนำไปทดสอบกับเซลล์เอ็นยึดปริทันต์ ผลปรากฎว่าออสทีโอพอนทินส่วน
C-terminal สามารถกระตุ้นยีนส์ที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการ bone remodeling ได้ดีกว่าออสทีโอ
พอนทินส่วนอื่นๆ งานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาสภาวะที่เหมาะสมในการผลิตโปรตีนออสทีโอ
พอนทินส่วน C-terminal ในต้นยาสูบ โดยใช้ Agrobacterium tumefaciens สายพันธุ์ GV3101 ที่
มีพลาสมิด p BYR2eK2Md-C-OPN-His มาศึกษาผลของความเข้มข้นของเชื้อที่ใช้ในการฉีดเข้าใบของ
ต้นยาสูบ ซึ่งศึกษาที่ OD600 = 0.2, 0.4, 0.6 และ 0.8 โดยทำการศึกษาเป็นเวลา 6 วัน (1-6 dpi)
หลังทำการฉีดเชื้อ นำใบไม้มาสกัดและวิเคราะห์ปริมาณโปรตีนด้วยเทคนิค western blot จาก
การศึกษาพบว่า สภาวะที่เหมาะสมที่สุดในการผลิตโปรตีนออสทีโอพอนทินส่วน C-terminal ในต้น
ยาสูบคือใช้ความเข้มข้นของเชื้อที่ 0D600 - 0.4 โดยเก็บใบหลังจากฉีดเป็นเวลา 3 วัน (3 dpi)
