Abstract:
แบคทีเรียสังเคราะห์แสงสีม่วงแดงที่ไม่สะสมกำมะถัน (Purple non-sulfur bacteria, PNSB) สามารถสร้างสารที่มีคุณค่าและนำไปใช้ประโยชน์ต่าง ๆ ได้ เช่น รงควัตถุและเอนไซม์ ในปัจจุบัน เอนไซม์จากแบคทีเรียถูกใช้ประโยชน์ทางเทคโนโลยีชีวภาพและอุตสาหกรรมต่าง ๆ อย่างกว้างขวาง ในการศึกษานี้จึงมีวัตถุประสงค์ที่จะคัดแยก PNSB ที่สามารถผลิตเอนไซม์โปรตีเนส อะไมเลส และไลเปส โดยได้คัดแยก PNSB จากแหล่งน้ำจืดในจังหวัดสมุทรสาครและสุพรรณบุรี เพาะเลี้ยงภายใต้ภาวะ photoheterotroph ในอาหารเลี้ยงเชื้อเหลว RCVB ที่ความเข้มแสง 3,000-3,500 ลักซ์ สามารถคัดแยก PNSB ได้ 66 ไอโซเลท เมื่อนำไปคัดกรองหาไอโซเลทที่สามารถผลิตโปรตีเนส อะไมเลส และไลเปส บนอาหารเลี้ยงเชื้อแข็ง skim milk, starch และ tributyrin ตามลำดับ ภายใต้ภาวะ chemoheterotroph พบว่ามี 6 ไอโซเลท ที่สามารถผลิตอะไมเลส 12 ไอโซเลทที่สามารถผลิตโปรตีเนสและทั้ง 66 ไอโซเลท สามารถผลิตไลเปสได้ เมื่อเลือกสายพันธุ์ที่สามารถสร้างเอนไซม์แต่ละชนิดได้สูงสุด 5 สายพันธุ์แรกไปวิเคราะห์แอกทิวิตีเอนไซม์อะไมเลสจากเชื้อที่เลี้ยงทั้งภายใต้ภาวะ chemoheterotroph ในอาหารเลี้ยงเชื้อเหลว RCVB ที่มี 1% starch soluble เป็นแหล่งคาร์บอน พบไอโซเลทที่ให้แอกทิวิตีของอะไมเลสได้สูงสุดคือ SP9 ได้เท่ากับ 0.518 ± 0.06 ยูนิต/มิลลิลิตร เมื่อเลี้ยงเป็นเวลา 8 วัน เมื่อคำนวณแอกทิวิตีจำเพาะของอะไมเลส พบว่า SP9 ยังเป็นสายพันธุ์ที่มีแอกทิวิตีจำเพาะสูงสุด เท่ากับ 176.11 ±4.55 ยูนิต/กรัมน้ำหนักเซลล์แห้งและ พบว่า การเลี้ยงภายใต้ภาวะ chemoheterotroph จะให้แอกทิวิตีและแอคทิวิตีจำเพาะของอะไมเลสที่สูงกว่าการเลี้ยงในภาวะ photoheterotroph นอกจากนี้ สายพันธุ์ SP9 ยังสามารถสร้างเอนไซม์โปรตีเอสและไลเปสอีกด้วย
