การคัดแยกแบคทีเรียสังเคราะห์แสงที่ผลิต โปรตีเนส อะไมเลสและไลเปส

บัณฑิตา จิตบรรเจิด

dc.contributor.advisor	กอบชัย ภัทรกุลวณิชย์
dc.contributor.author	บัณฑิตา จิตบรรเจิด
dc.contributor.other	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. คณะวิทยาศาสตร์
dc.date.accessioned	2022-06-15T09:41:51Z
dc.date.available	2022-06-15T09:41:51Z
dc.date.issued	2563
dc.identifier.uri	http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/78821
dc.description	โครงงานเป็นส่วนหนึ่งของการศึกษาตามหลักสูตรปริญญาวิทยาศาสตรบัณฑิต ภาควิชาจุลชีววิทยา คณะวิทยาศาสตร์ จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย ปีการศึกษา 2563	en_US
dc.description.abstract	แบคทีเรียสังเคราะห์แสงสีม่วงแดงที่ไม่สะสมกำมะถัน (Purple non-sulfur bacteria, PNSB) สามารถสร้างสารที่มีคุณค่าและนำไปใช้ประโยชน์ต่าง ๆ ได้ เช่น รงควัตถุและเอนไซม์ ในปัจจุบัน เอนไซม์จากแบคทีเรียถูกใช้ประโยชน์ทางเทคโนโลยีชีวภาพและอุตสาหกรรมต่าง ๆ อย่างกว้างขวาง ในการศึกษานี้จึงมีวัตถุประสงค์ที่จะคัดแยก PNSB ที่สามารถผลิตเอนไซม์โปรตีเนส อะไมเลส และไลเปส โดยได้คัดแยก PNSB จากแหล่งน้ำจืดในจังหวัดสมุทรสาครและสุพรรณบุรี เพาะเลี้ยงภายใต้ภาวะ photoheterotroph ในอาหารเลี้ยงเชื้อเหลว RCVB ที่ความเข้มแสง 3,000-3,500 ลักซ์ สามารถคัดแยก PNSB ได้ 66 ไอโซเลท เมื่อนำไปคัดกรองหาไอโซเลทที่สามารถผลิตโปรตีเนส อะไมเลส และไลเปส บนอาหารเลี้ยงเชื้อแข็ง skim milk, starch และ tributyrin ตามลำดับ ภายใต้ภาวะ chemoheterotroph พบว่ามี 6 ไอโซเลท ที่สามารถผลิตอะไมเลส 12 ไอโซเลทที่สามารถผลิตโปรตีเนสและทั้ง 66 ไอโซเลท สามารถผลิตไลเปสได้ เมื่อเลือกสายพันธุ์ที่สามารถสร้างเอนไซม์แต่ละชนิดได้สูงสุด 5 สายพันธุ์แรกไปวิเคราะห์แอกทิวิตีเอนไซม์อะไมเลสจากเชื้อที่เลี้ยงทั้งภายใต้ภาวะ chemoheterotroph ในอาหารเลี้ยงเชื้อเหลว RCVB ที่มี 1% starch soluble เป็นแหล่งคาร์บอน พบไอโซเลทที่ให้แอกทิวิตีของอะไมเลสได้สูงสุดคือ SP9 ได้เท่ากับ 0.518 ± 0.06 ยูนิต/มิลลิลิตร เมื่อเลี้ยงเป็นเวลา 8 วัน เมื่อคำนวณแอกทิวิตีจำเพาะของอะไมเลส พบว่า SP9 ยังเป็นสายพันธุ์ที่มีแอกทิวิตีจำเพาะสูงสุด เท่ากับ 176.11 ±4.55 ยูนิต/กรัมน้ำหนักเซลล์แห้งและ พบว่า การเลี้ยงภายใต้ภาวะ chemoheterotroph จะให้แอกทิวิตีและแอคทิวิตีจำเพาะของอะไมเลสที่สูงกว่าการเลี้ยงในภาวะ photoheterotroph นอกจากนี้ สายพันธุ์ SP9 ยังสามารถสร้างเอนไซม์โปรตีเอสและไลเปสอีกด้วย	en_US
dc.description.abstractalternative	Purple non-sulfur bacteria (PNSB) can produce many valuable and useful products such as pigments and enzymes. Nowadays, enzymes from bacteria were widely used in various biotechnology and industrial processes. Therefore, the objective of this study was to isolate and screen for the proteinase, amylase and lipase producing purple non-sulfur bacteria. 66 PNSB strains were isolated from fresh water in Samut Sakhon and Suphanburi provinces by enrichment method under photoheterotroph condition in RCVB medium under light 3,000-3-500 lux. After screening for amylase, proteinase and lipase production on starch, skim milk, and tributyrin agar plates respectively. 6 isolates could produce amylase, 12 isolates produced proteinase and all of 66 PNSB isolates produced lipase under chemoheterotroph condition. The results showed that strain SP9 exhibited highest amylase activity of 0.518 ± 0.06 Unit/ml when cultured in RCVB medium containing 1% starch soluble under chemoheterotroph condition after 8 days cultivation. The highest specific amylase activity of 176 ± 4.55 Unit/g obtained from SP9 isolate. Cultivation of SP9 under chemoheterotroph condition resulted in higher enzyme activity than under photoheterotroph condition. Moreover, SP9 was capable of producing proteinase amylase and lipase.	en_US
dc.language.iso	th	en_US
dc.publisher	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย	en_US
dc.rights	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย	en_US
dc.subject	แบคทีเรียสังเคราะห์แสง	en_US
dc.subject	โปรติเนส	en_US
dc.subject	อะมีเลส	en_US
dc.subject	ไลเปส	en_US
dc.subject	Photosynthetic bacteria	en_US
dc.subject	Proteinase	en_US
dc.subject	Amylases	en_US
dc.subject	Lipase	en_US
dc.title	การคัดแยกแบคทีเรียสังเคราะห์แสงที่ผลิต โปรตีเนส อะไมเลสและไลเปส	en_US
dc.title.alternative	Isolation of the proteinase, amylase and lipase producing photosynthetic bacteria	en_US
dc.type	Senior Project	en_US
dc.degree.grantor	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย	en_US